申请/专利权人：华东师范大学

申请日：2022-06-08

公开（公告）日：2024-03-26

公开（公告）号：CN114836428B

主分类号：C12N15/12

分类号：C12N15/12;C12N15/113;C12N15/867;C12N15/62;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.26#授权;2022.08.19#实质审查的生效;2022.08.02#公开

摘要：本发明公开了一种TIGIT基因干扰的嵌合抗原受体NK细胞及其用途。本发明提出利用RNA干扰技术敲低TIGIT在NKG2D‑CAR‑NK细胞中的表达，普遍增强CAR‑NK细胞功能的通用型方法，提升NKG2D‑CAR‑NK细胞免疫疗法的效果。本发明还公开了一种TIGIT基因RNAi靶序列以及基于该靶序列的干扰序列、及其构建方法和应用。本发明可应用于恶性肿瘤病免疫治疗中，为利用CAR‑NK治疗肿瘤提供新的改良思路，具有广泛应用前景。

主权项：1.一种表达载体质粒的构建方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1将NKG2D蛋白的胞外段基因序列加入CD8a信号肽的序列，经过RT-PCR方式扩增得到如SEQIDNO.4所示的Sig-NKG2D胞外段序列；2将所述Sig-NKG2D胞外段序列通过重叠PCR方式连接到二代CAR4-1BB-CD3ζ，获得pLL3.7-NKG2D-CAR载体；3将干扰序列连接到所述pLL3.7-NKG2D-CAR载体上，得到所述pLL3.7-TIGIT-shRNA-NKG2D-CAR表达载体质粒；所述干扰序列的序列如SEQIDNO.2、3所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华东师范大学 一种TIGIT基因干扰的嵌合抗原受体NK细胞及其应用

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