申请/专利权人：昆明理工大学

申请日：2024-01-04

公开（公告）日：2024-03-29

公开（公告）号：CN117778510A

主分类号：C12P21/06

分类号：C12P21/06;C07K1/14;C07K1/16;C07K5/117;C07K5/087;C07K5/083;G01N33/68;G01N30/02;G01N30/72

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.16#实质审查的生效;2024.03.29#公开

摘要：本发明涉及食品添加剂技术领域，且公开了一种马槟榔苦味肽的制备方法，包括将马槟榔种仁粉碎，后对马槟榔种仁粉末依次进行脱脂、酶解、高温灭酶，再结合感官评价，利用凝胶层析色谱和反相高效液相色谱进一步分离纯化，获取并确定苦味最强的组分，通过纳升液相质谱串联质谱对苦味肽进行鉴定。本发明建立了一种马槟榔苦味肽的提取、分离、纯化及鉴定方法，展示了马槟榔中苦味肽的结构及其苦味特性,在马槟榔中首次发现了五条新型苦味肽，且所制备的苦味肽具备苦味和抑制甜味的作用，能有效调和风味食品风味，是一类理想的天然食品调味剂，具有良好的开发前景。

主权项：1.一种马槟榔苦味肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤；2.S1、马槟榔种仁的处理：选用无虫、无霉、饱满的马槟榔种子，去壳，粉碎种仁，过筛；将所得马槟榔种仁粉末加入石油醚，磁力搅拌脱脂，抽滤去除石油醚层，获取马槟榔脱脂粉末；后置于通风橱室温干燥，收集储存备用；3.S2、马槟榔酶解液制备：将马槟榔脱脂粉末与超纯水混合制成悬浮液，调节pH，加入碱性蛋白酶，水浴磁力搅拌提取，结束后置于沸水浴中灭酶；冷却离心，取上清液，进行真空冷冻干燥，收集保存马槟榔粗多肽冻干粉末；4.S3、凝胶过滤色谱分离：将上述马槟榔粗多肽冻干粉末溶于超纯水中配制样液，将样液载入装填了SephadexG-15凝胶的层析柱中，收集紫外光谱图中各峰所对应的组分，进行真空冷冻干燥；S4、感官评价：通过品尝并与标准溶液进行比对，对样品溶液进行感官描述及评分；S5、反相高效液相色谱分离：将苦味值最高的凝胶组分溶于超纯水中，通过反相高效液相色谱对其进行纯化，收集各峰对应的组分，旋蒸除去有机试剂，进行真空冷冻干燥，结合感官评价，选出最苦的组分为马槟榔苦味肽；S6、苦味肽序列鉴定：利用LC-MSMS检测苦味肽序列，使用Byonic检索目标蛋白数据库；S7、苦味肽合成及苦味特性验证。

全文数据：

权利要求：

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