申请/专利权人：复旦大学

申请日：2023-01-06

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802201A

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12N15/11

优先权：["20220930 CN 2022112127811"]

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.02#公开

摘要：本发明公开了一种基因突变检测方法，该方法包括以下步骤：1以cfDNA为模板，用与模板对应的5’端带有测序公共接头序列、中部带有随机碱基编码序列、3’端带有与模板靶标分子互补序列的特异引物，进行单分子标记反应；2以单分子标记反应产物为模板，进行单端特异增强指数扩增反应；3进行双端非特异指数扩增反应，获得文库并测序。本发明还公开了用于上述方法的检测试剂盒和上述方法的用途。本发明通过对cfDNA模板用特异引物延伸法进行高效单分子标记反应，去除非靶标DNA的竞争干扰，再对单分子标记产物进行单端特异增强指数扩增，提高了建库的特异性和建库质量，从而提高了检测的特异性和灵敏度。

主权项：1.一种富集cfDNA的方法，其特征在于，包括以下步骤：1在提取cfDNA后，对cfDNA片段进行加长，所述对cfDNA片段进行加长是使用末端转移酶，在cfDNA片段末端添加长链结构。2以步骤1加长后的cfDNA为模板，使用与目标靶区互补的生物素修饰的单端特异引物，进行单链特异线性富集反应；3将步骤2的产物与亲和素修饰的非磁性微球进行结合反应，分离并分别回收与微球结合和未与微球结合的原始模板cfDNA。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 复旦大学 基因突变及甲基化检测方法、试剂盒及用途

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