申请/专利权人：安徽瑞拜药业有限公司

申请日：2023-12-26

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117802087A

主分类号：C12N15/10

分类号：C12N15/10;C01G49/08;C12Q1/6806

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.19#实质审查的生效;2024.04.02#公开

摘要：本发明公开了一种核酸提取工艺，属于生物技术领域。本发明中的核酸提取工艺，包括以下步骤：步骤1、裂解与结合：将核酸样品、裂解液加入离心管中进行裂解，加入磁珠结合，磁力作用下固定磁珠，吸弃离心管内溶液；步骤2、清洗：在离心管内加入洗涤液清洗磁珠，磁力作用下固定磁珠，吸弃离心管内溶液；步骤3、洗脱：在离心管内加入洗脱液进行洗脱，核酸从磁珠表面解吸附进入洗脱液中，磁力作用下固定磁珠，转移洗脱液至新的离心管内，即为提取好的核酸。本发明中所制备的磁珠具有抗蛋白质吸附性能和抗污染性能，提取的核酸纯度高，浓度大，且提取工艺安全环保。

主权项：1.一种核酸提取工艺，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、裂解与结合：将核酸样品加入离心管中，加入裂解液，混合混匀，65-80℃保温20-30min；加入磁珠，混合均匀，结合8-10min，通过磁力作用使离心管内磁珠紧贴于离心管壁，吸弃离心管内溶液；步骤2、清洗：在离心管内加入洗涤液，充分混匀，清洗磁珠，通过磁力作用使离心管内磁珠紧贴于离心管壁，吸弃离心管内溶液；步骤3、洗脱：在离心管内加入洗脱液，充分混匀，加热至55-60℃，洗脱3-5min，使核酸从磁珠表面解吸附并进入洗脱液中，通过磁力作用使离心管内磁珠紧贴于离心管壁，转移洗脱液至新的离心管内，即为提取好的核酸；其中，所述磁珠通过如下步骤制备：S1、将Na2B4O7和Na2CO3加入去离子水中，N2鼓泡0.5h，加入2-甲基丙烯酸酐、盐酸多巴胺和四氢呋喃，调节pH为7-9，N2氛围下搅拌，洗涤，调节pH至2-2.5，萃取、干燥、旋蒸、重结晶，干燥得到多巴胺-甲基丙烯酰胺；S2、密封体系下，将KH-570接枝Fe3O4纳米粒子、多巴胺-甲基丙烯酰胺和引发剂加入去离子水中，超声分散，调节pH为8-9，通惰性气体0.5h，加热至60-80℃，N2氛围下反应，敞开体系终止反应，离心、过滤、洗涤，真空干燥至恒重，得到双亲性Fe3O4纳米粒子，即为所述磁珠。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 安徽瑞拜药业有限公司 一种核酸提取工艺

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