申请/专利权人：西南大学

申请日：2021-10-12

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN113881798B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12Q1/6869;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2022.01.21#实质审查的生效;2022.01.04#公开

摘要：本发明属于生物信息技术领域，公开了一种叶绿体基因组高变位点及其检测方法与应用，所述叶绿体基因组高变位点由一对引物序列确定，所述引物的核苷酸序列为SEQIDNO：1和SEQIDNO：2；所述叶绿体基因组高变位点的检测方法包括：合成引物；提取待分析柑桔类材料的基因组总DNA，PCR扩增获得高变位点序列；将扩增产物进行电泳检测，回收目的DNA片段；将目的DNA片段加尾，获得重组T载体；将重组T载体转化大肠杆菌感受态细胞；蓝白斑筛选，挑取白色单菌落恒温培养，菌液测序。本发明通过对该序列进行基因组扩增、克隆、测序和比对分析，可以较好地判断不同柑桔果树的胞质来源，实现对柑桔类果树的类群区分。

主权项：1.一种叶绿体基因组高变位点的扩增检测方法，其特征在于，所述叶绿体基因组高变位点的扩增检测方法包括以下步骤：步骤一，合成用于扩增叶绿体基因组高变位点序列的引物，所述引物的核苷酸序列为SEQIDNO：1和SEQIDNO：2；步骤二，提取待分析柑桔类材料的基因组总DNA，DNA聚合酶链式反应PCR扩增获得高变位点序列；步骤三，将扩增产物加入琼脂糖凝胶孔中进行电泳检测，回收目的DNA片段，片段大小为100bp～500bp；步骤四，将回收的目的DNA片段加尾，采用克隆载体pGEM-T-easy获得重组T载体；将连接好的重组T载体转化大肠杆菌感受态细胞E.coliDH5α；蓝白斑筛选，挑取白色单菌落5～6个，LA液体培养基37℃恒温摇床振荡过夜培养，菌液送测序公司测序。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 西南大学 一种叶绿体基因组高变位点及其检测方法与应用

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