申请/专利权人：武汉轻工大学

申请日：2022-09-02

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN115368432B

主分类号：C07K1/107

分类号：C07K1/107;C07K1/30

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2022.12.09#实质审查的生效;2022.11.22#公开

摘要：本发明公开一种原位界面糖基化修饰油体膜蛋白的制备方法；所述原位界面糖基化修饰油体膜蛋白的制备方法包括以下步骤：提取油脂体；将所述油脂体与糖溶液混合，再加入pH调节剂，加热反应，离心，获得上层糖基化油脂体；向所述上层糖基化油脂体中加入冷丙酮，离心，再加入石油醚，离心，再加入氯仿‑甲醇混合液，离心获得沉淀，将所述沉淀干燥，获得糖基化修饰的油体膜蛋白。本发明旨在解决现有油脂体的改性方法成本高、操作过程复杂、产量低的问题。

主权项：1.一种原位界面糖基化修饰油体膜蛋白的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：提取油脂体；将所述油脂体与糖溶液混合，再加入pH调节剂，加热反应，离心，获得上层糖基化油脂体；向所述上层糖基化油脂体中加入冷丙酮，离心，再加入石油醚，离心，再加入氯仿-甲醇混合液，离心获得沉淀，将所述沉淀干燥，获得糖基化修饰油体膜蛋白；所述糖溶液为葡聚糖5k溶液、葡聚糖10k溶液和葡聚糖20k溶液中的任意一种；其中，提取油脂体的步骤包括：将样品粉碎，加入超纯水，匀浆、过滤，获得滤液；向所述滤液中加入蔗糖，调节pH值至不小于9，搅拌离心获得上层膏状物；用8M尿素溶液清洗所述上层膏状物后离心，重复2~3次，获得油脂体；将所述油脂体与糖溶液混合，再加入pH调节剂，加热反应，离心，获得上层糖基化油脂体的步骤包括：将所述油脂体与糖溶液混合，获得混合溶液；向所述混合溶液中加入氢氧化钠溶液直至pH值不低于9.0，加热到反应结束，获得反应物；在10000~12000rpm的条件下离心处理所述反应物10~15min，获得上层糖基化油脂体；其中，所述糖溶液与所述油脂体的质量比为1：（0.2~5）,所述加热反应的温度为60~100℃,所述加热反应的时间为30~90min。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 武汉轻工大学 原位界面糖基化修饰油体膜蛋白的制备方法

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