申请/专利权人：福建亿彤生物科技有限公司

申请日：2022-06-28

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN114957438B

主分类号：C07K14/47

分类号：C07K14/47;C07K1/04;C07K1/06;C07K1/18;C07K1/16;C07K1/14;G01N33/68

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2023.10.17#专利申请权的转移;2022.09.16#实质审查的生效;2022.08.30#公开

摘要：本发明涉及用于检测阿尔茨海默病的人Aβ1‑42抗原决定簇多肽及制法。该人Aβ1‑42抗原决定簇多肽可用于制备抗原、抗体、用途及试剂盒；本发明的人Aβ1‑42抗原决定簇多肽的氨基酸序列为Tyr‑Arg‑Asp‑Gly‑Asp‑Gly‑Asp‑Met‑Val‑Gly‑Gly‑Val‑Val‑Ile‑Ala。Aβ1‑42抗原可由人Aβ1‑42抗原决定簇多肽与蛋白载体偶联制得；Aβ1‑42单克隆抗体或多克隆抗体由本发明的Aβ1‑42抗原制得；Aβ1‑42单克隆抗体或多克隆抗体用于制备Aβ1‑42体外诊断试剂盒；本发明的人Aβ1‑42抗原决定簇多肽具有良好的抗原性，用其制备的抗原免疫原免疫动物能够产生高度特异性的单克隆抗体和多克隆抗体，从而可应用于人Aβ1‑42的体外检测。本发明能够以高纯度大批量制备人Aβ1‑42抗原决定簇多肽。

主权项：1.制备人Aβ1-42抗原决定簇多肽的方法，所述人Aβ1-42抗原决定簇多肽具有如下氨基酸序列：Tyr-Arg-Asp-Gly-Asp-Gly-Asp-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala；其中，该方法是以如下方式接入Tyr的：向制得的Fmoc-ArgTos-AspOtBu-Gly-AspOtBu-Gly-AspOtBu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-树脂中，加入20%六氢吡啶二甲基甲酰胺溶液，室温下振荡进行脱帽反应，去掉氮端Fmoc保护基，抽滤除去溶剂后，再分别用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷交替清洗树脂两次，并抽滤除去溶剂；将Fmoc-TyrtBu-OH、HBTU、HOBT加至二甲基甲酰胺中使溶解，加入DIEA和氨丁三醇，搅匀，移入包含上述经处理树脂的反应器中，室温振荡反应，抽滤除去反应液，再分别用二甲基甲酰胺、甲醇、二氯甲烷交替清洗树脂两次，抽滤除去溶剂，接肽反应结束后，滤取树脂，放入真空干燥器内干燥，得Fmoc-TyrtBu-ArgTos-AspOtBu-Gly-AspOtBu-Gly-AspOtBu-Met-Val-Gly-Gly-Val-Val-Ile-Ala-树脂即保护的十五肽树脂；其中，所用的Fmoc保护氨基酸：HBTU：HOBT：DIEA的摩尔比=1：1：1：4，以摩尔百分数计氨丁三醇的量是DIEA的6%。

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