申请/专利权人：南京科佰基因科技有限公司

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844868A

主分类号：C12N15/867

分类号：C12N15/867;C12N15/54;C12N5/10;C12Q1/02;G01N21/76

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明公开一种测定JAK2激酶抑制剂生物学活性细胞株及其构建方法与应用，构建方法包括JAK2V617F突变基因和TEL‑JAK2融合基因合成后构建到质粒，质粒分别导入BAF3细胞，通过嘌呤霉素抗性筛选获得稳定细胞株；筛选后获得的稳定细胞株用细胞培养基中在一定细胞密度的情况下接种到96孔细胞培养板，加入梯度稀释的JAK2激酶抑制剂，继续培养，检测细胞增值的情况，建立细胞增殖与JAK2激酶抑制剂生物学的量效关系。

主权项：1.一种稳定测定JAK2激酶抑制剂生物学活性细胞株的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）如SEQIDNO:1所示的JAK2V617F和如SEQIDNO:2所示TEL-JAK2基因合成；（2）将扩增的JAK2V617F和TEL-JAK2基因分别构建到PLVX-puro载体，构建质粒PLVX-JAK2V617F-puro和PLVX-Tel-JAK2-puro；（3）将PLVX-JAK2V617F和PLVX-Tel-JAK2-puro质粒分别转染至BAF3细胞，得到BAF3JAK2V617F细胞和BAF3-Tel-JAK2细胞，通过嘌呤霉素筛选阳性细胞株，对阳性细胞株进行WB鉴定，获得稳定细胞株。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京科佰基因科技有限公司 一种稳定测定JAK2激酶抑制剂生物学活性细胞株及其构建方法与应用

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