申请/专利权人：镇江华大检测有限公司

申请日：2023-11-15

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN117821571A

主分类号：C12Q1/686

分类号：C12Q1/686;C12Q1/6806

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.23#实质审查的生效;2024.04.05#公开

摘要：本发明公开了一种改进食品及饲料中鸭源性成分检测的PCR方法，包括以下步骤：S1:称取样品，研磨混匀制得试样，提取试样的DNA模板；S2、制备体积为25μL的PCR扩增产物；S3、设阳性对照、阴性对照、空白对照；S4、将S2中制得的PCR扩增产物于变性、退火、延伸，反应完成后在4℃下保存；S5、制备琼脂糖凝胶加入核酸染料，在电泳槽中将各PCR扩增产物分别和上样缓冲液混合、点样、加入合适的DNA分子标记，恒压、电泳、凝胶成像仪下观察电泳结果；S6、电泳结果出现可疑阳性时，将PCR扩增产物进行DNA测序。本发明对反应试剂和时间等经过改进，安全无毒的同时，缩短实验时间，提高检测的准确性。

主权项：1.一种改进食品及饲料中鸭源性成分检测的PCR方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、称取样品，研磨混匀制得试样，提取试样的DNA模板；S2、制备体积为25μL的PCR扩增产物，所述PCR扩增产物包括DNA模板2μL，10×PCR缓冲液2.5μL，dNTP2.0μL,上、下游引物各1μL,TaqDNA聚合酶0.5μL,加双蒸水补足25μL；S3、设阳性对照、阴性对照、空白对照；S4、将S2中制得的所述PCR扩增产物于94℃预变性2min，94℃变性30s,68℃退火30s,72℃延伸40s,30个循环，最后72℃延伸5min，反应完成后在4℃下保存；S5、制备2％的琼脂糖凝胶并加入核酸染料至终浓度为0.5μgmL，在电泳槽中加入电泳缓冲液，使液面刚没过琼脂糖凝胶，将各PCR扩增产物分别和上样缓冲液混合，点样，加入合适的DNA分子标记，恒压，电泳至溴酚蓝指示剂迁移至凝胶23后，凝胶成像仪下观察电泳结果并记录；S6、电泳结果出现可疑阳性时，将所述PCR扩增产物进行DNA测序。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 镇江华大检测有限公司 一种改进食品及饲料中鸭源性成分检测的PCR方法

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