申请/专利权人：上海百翱杰生物科技有限公司

申请日：2023-06-02

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN117821368A

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.05#公开

摘要：本发明公开了一种哺乳动物细胞系SILAC标记方法，涉及生物技术领域，包括以下步骤：步骤1、将培养于普通培养基中的目的细胞用胰酶消化后，加入SILAC完全培养基中进行中和、离心、弃上清后得到细胞沉淀，之后向细胞沉淀中加入SILAC完全培养重悬细胞；步骤2、取所述步骤1中最终所得细胞总量的13，铺于25cm2的培养瓶中，并补加适量的SILAC完全培养基后进行培养；步骤3、待所述步骤2中的细胞汇合度至90％‑100％后，消化，弃掉多余的细胞，剩余10‑20％的细胞于培养瓶中，补加SILAC完全培养基，直至细胞汇合度再次达到90％‑100％；步骤4、重复所述步骤36‑8次，即完成对目的细胞的SILAC标记。本发明具有有效提高细胞SILAC标记效率的效果。

主权项：1.一种哺乳动物细胞系SILAC标记方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、将培养于普通培养基中的目的细胞用胰酶消化后，加入SILAC完全培养基中进行中和、离心、弃上清后得到细胞沉淀，之后向细胞沉淀中加入SILAC完全培养重悬细胞；步骤2、取所述步骤1中最终所得细胞总量的13，铺于25cm2的培养瓶中，并补加适量的SILAC完全培养基后进行培养；步骤3、待所述步骤2中的细胞汇合度至90％-100％后，消化，弃掉多余的细胞，剩余10-20％的细胞于培养瓶中，补加SILAC完全培养基，直至细胞汇合度再次达到90％-100％；步骤4、重复所述步骤36-8次，即完成对目的细胞的SILAC标记；其中，所述SILAC完全培养基主要由含13C6-Lysine及13C6-Argine的氨基酸、包含叶酸的维生素、包含氯化钠的无机盐、包含4.5gL的葡萄糖、含15mgL的酚红作为pH指示剂、10％透析胎牛血清组成。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海百翱杰生物科技有限公司 一种哺乳动物细胞系SILAC标记方法

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