申请/专利权人:上海欧易生物医学科技有限公司
申请日:2023-12-22
公开(公告)日:2024-04-12
公开(公告)号:CN117867072A
主分类号:C12Q1/6806
分类号:C12Q1/6806;C12Q1/24
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开
摘要:本发明公开了一种肠道样本预处理和单细胞悬液制备方法,即一种肠道组织样本预处理方法和优化的两步法制备单细胞悬液的方法。本发明通过样本固定预处理、优化酶解消化体系和实验流程,显著提升了肠道样本在保存或运输期间的样本稳定性,缩短了解离所需时间,并显著改善了以往肠道样本单细胞测序中常见的细胞类型偏好性和线粒体基因表达偏高等缺点。本发明方法可应用于单细胞测序、单细胞悬液制备、肠道原代细胞解离等。本发明具有广泛应用前景。
主权项:1.一种肠道样本预处理和两步法制备单细胞悬液的方法,其特征在于,所述方法包括:将采集并清洗好的肠道组织用含有二硫双琥珀酰亚胺丙酸酯的PBS溶液固定后再放入组织保存液中保存,用含EDTA的消化液I消化肠道组织,使上皮层与固有层分离开;将固有层组织剪碎并用消化液II消化;在固有层消化期间用TrypLE处理上皮层细胞;然后,将得到的上皮层细胞和固有层细胞分别进行红细胞裂解和细胞清洗,进行镜检计数和特定细胞比例混合上机。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 上海欧易生物医学科技有限公司 一种肠道样本预处理和两步法制备单细胞悬液的方法及其应用
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