申请/专利权人：天益健康科学研究院(镇江)有限公司

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117867077A

主分类号：C12Q1/6825

分类号：C12Q1/6825;C12Q1/682

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明公开了一种基于链置换反应的生物传感器，所述生物传感器包括催化型发夹CH1、催化型发夹CH2、Cas12a蛋白、crRNA和ssDNA报告分子；本发明基于Toehold介导的DNA链替换反应的恒温、无酶核酸扩增技术，并结合CRISPRCas12a系统构建一种新型、高扩增效率且检测信号联级放大的TMSDR‑Cas12a生物传感器，该技术灵敏度高、特异性好，常温条件下就能够用于样品中痕量核酸的快速可视化检测。

主权项：1.一种基于链置换反应的生物传感器，其特征在于，所述生物传感器包括催化型发夹CH1、催化型发夹CH2、Cas12a蛋白、crRNA和ssDNA报告分子；所述催化型发夹CH1含有一段碱基对互补形成茎部结构，该结构包被着可激活Cas12a效应蛋白的核苷酸链DNA序列，催化型发夹CH1粘性末端的单链作为支点链可与目标链杂交；所述催化型发夹CH2含有一段碱基对互补形成茎部结构，其中一条带有悬挂支点链的序列与催化型发夹CH1环结构序列形成碱基互补配对，催化型发夹CH2的环结构序列中包含了一段目标链，其作用在于在杂交反应过程中能够将与发夹CH1杂交结合的目标链置换出来；所述Cas12a蛋白为具有核酸内切酶活性且具有附属切割活性的Cas12a蛋白；所述ssDNA报告分子带有荧光基团，用于荧光信号检测和可视化检测；所述crRNA能与Cas12a以及靶标DNA形成三元复合体，同时该复合体产生trans切割的活性并切割荧光基团标记的ssDNA报告分子，产生荧光信号。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 天益健康科学研究院(镇江)有限公司 一种基于链置换反应的生物传感器及其应用

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