申请/专利权人:北京豪思生物科技股份有限公司;江苏豪思睦可生物科技有限公司;湖南豪思生物科技有限公司;江苏豪思生物科技有限公司
申请日:2023-12-29
公开(公告)日:2024-04-12
公开(公告)号:CN117491543B
主分类号:G01N30/06
分类号:G01N30/06;G01N30/02;G01N30/72
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.12#授权;2024.02.23#实质审查的生效;2024.02.02#公开
摘要:本发明涉及分析检测技术领域,尤其涉及一种人血浆中腐胺浓度的检测方法。所述检测方法包括将所述待测样品进行前处理,前处理包括:S1:将待测样品与内标溶液混合并进行孵育,而后调整pH为11~13得到第一混合溶液;S2:将第一混合溶液与蛋白沉淀剂混合,离心取上清液;S3:将上清液吹干后加入衍生试剂和pH为10~12的pH缓冲溶液,避光条件下进行衍生反应,得到第二混合溶液;S4:将第二混合溶液进行淬灭,而后离心得到上清液。所述检测方法能满足方法验证过程中对检出限、精密度、准确度和基质效应等方面的要求,同时还能提高检测效率,这对于实际应用时评价人体血样中腐胺浓度有重要作用。
主权项:1.一种人血浆中腐胺浓度的检测方法,其特征在于,包括:S1:将待测样品与内标溶液混合并进行孵育,而后调整pH为11~13得到第一混合溶液;其中,使用碱性溶液调整pH为上述范围;所述碱性溶液包括氢氧化钠或氨水;S2:将所述第一混合溶液与蛋白沉淀剂混合,离心取上清液;S3:将所述上清液吹干后加入丹磺酰氯和pH为10~12的pH缓冲溶液,避光条件下进行衍生反应,得到第二混合溶液;S4:将所述第二混合溶液进行淬灭,而后离心得到上清液;其中,所述淬灭包括:将所述第二混合溶液与甲酸混合;S5:将所述上清液通过液相色谱-串联质谱法进行检测;其中,液相色谱检测条件包括:色谱柱为C18柱,规格为3.0×50mm,3μm;流速为0.4~0.7mLmin;柱温为30~40℃;流动相A由甲酸、甲酸铵和水组成,流动相B为乙腈和异丙醇的混合溶液;所述流动相A中,甲酸铵的浓度为3~10mM,甲酸的浓度为0.05~0.2wt%;所述流动相B中,乙腈和异丙醇的体积比为(1~3):1;液相色谱的洗脱程序为: ;其中,%代表体积百分比,且流动相A的体积百分比与流动相B的体积百分比和为1;质谱检测条件包括:1)源气参数: ;2)离子对参数: ; :定量离子。
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百度查询: 北京豪思生物科技股份有限公司;江苏豪思睦可生物科技有限公司;湖南豪思生物科技有限公司;江苏豪思生物科技有限公司 一种人血浆中腐胺浓度的检测方法
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