申请/专利权人:苏州派博思生物技术有限公司
申请日:2023-12-26
公开(公告)日:2024-04-16
公开(公告)号:CN117890254A
主分类号:G01N5/04
分类号:G01N5/04;G01N9/02
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.04.16#公开
摘要:本发明提供了一种准确定量包被抗体后磁珠的浓度的方法。在通过称重法对磁珠进行物理定量前,使用特殊组合的缓冲液依次进行清洗,减少包覆的抗体对磁珠浓度定量产生的影响,从而使检测结果更加准确。本发明能够实现包被以后磁珠溶液中磁珠含量的准确定量;定量过程中的处理方法可以减少甚至忽略蛋白、细胞或核酸等对于磁珠重量的影响。在后续的使用过程中,知道不同批次间磁珠的具体浓度,可以帮助控制批间差。
主权项:1.一种准确定量包被抗体后磁珠的浓度的方法,包括:1取n个干净的玻璃容器,烘干,冷却至室温后,称量每个空容器的重量A;2用移液管移取等量充分混匀的包被抗体后的磁珠溶液至n个容器中,称量每个容器的重量,并记录重量B;3计算这n个玻璃容器中移取的磁珠的重量偏差CV%=SDMean,如果CV5%,则继续下一步操作;如果CV%≥5%,则重复上述步骤1和2;4用磁铁吸附磁珠溶液,并小心的将每个容器中的澄清液体吸出;5加入缓冲液1至每个容器中,涡旋并充分混匀后,用磁铁吸附用缓冲液1充分混匀过的磁珠溶液,并小心的将每个容器中的澄清液体吸出;所述的缓冲液1为Tris缓冲液,且含有不低于1mLL的TritonX-100;6加入缓冲液2至每个容器中,涡旋并充分混匀后,用磁铁吸附用缓冲液2充分混匀过的磁珠溶液,并小心的将每个容器中的澄清液体吸出,重复该步骤不少于2次;所述的缓冲液2中含有不低于1gL的SDS;7将玻璃容器烘干,冷却至室温,称量各容器的重量C;8通过减重法间接计算容器中磁珠的重量,并计算n个玻璃容器中磁珠的平均值,得到磁珠的重量m,即m=C-A,包被抗体后的磁珠溶液中的磁珠的含量c=mV,V表示包被抗体后的磁珠溶液的体积。
全文数据:
权利要求:
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