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【发明授权】基于转座酶的基因组分析_生物辐射实验室股份有限公司_201880071427.7 

申请/专利权人:生物辐射实验室股份有限公司

申请日:2018-11-01

公开(公告)日:2024-04-16

公开(公告)号:CN111295443B

主分类号:C12N15/10

分类号:C12N15/10;C12Q1/6869;C12N9/96;C12N9/12

优先权:["20171102 US 62/580,946"]

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.04.16#授权;2020.10.20#实质审查的生效;2020.06.16#公开

摘要:提供了用于使用分区例如,液滴技术同时避免在液滴中进行扩增来对DNA样品进行条码化和分析的方法和试剂。

主权项:1.一种条码化DNA的方法,所述方法包括通过使DNA与载有寡核苷酸衔接子的转座酶接触向基因组DNA中随机引入寡核苷酸衔接子,其中寡核苷酸衔接子包含单链部分和双链部分,和其中转座酶将双链断裂引入DNA中,其中每个双链断裂形成两个DNA末端,并且转座酶将所述寡核苷酸衔接子连接至每个DNA末端的一条链,以形成在两端包含寡核苷酸衔接子的DNA片段同时维持DNA区段的相邻性;形成液滴,其中所述液滴包含所述DNA片段和具有珠特异性条码序列的第一寡核苷酸引物,其中第一寡核苷酸引物与珠连接,并包含游离3'末端,其中与基因组DNA相比,所述形成维持所述DNA片段的相邻性;在所述液滴中,用聚合酶缺口填充5’突出端,所述聚合酶具有链置换活性或具有5’-3’核酸外切酶活性以通过延伸3’末端产生双链序列;使第一寡核苷酸引物的3'末端与所述DNA片段上的寡核苷酸衔接子的3'末端杂交,使得在基因组DNA中有相同相邻性的DNA片段接受相同的珠特异性条码序列;并且合并液滴的内容物以形成反应混合物,从而形成条码化的DNA片段。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 生物辐射实验室股份有限公司 基于转座酶的基因组分析

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