申请/专利权人：广州市微生物研究所集团股份有限公司

申请日：2021-09-08

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN113584123B

主分类号：C12Q1/24

分类号：C12Q1/24;C12Q1/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.16#授权;2024.03.22#著录事项变更;2021.11.19#实质审查的生效;2021.11.02#公开

摘要：本发明公开了一种大肠杆菌噬菌体气溶胶的采集方法，包括如下步骤：1）制备新鲜的大肠杆菌菌悬液，备用；2）制备新鲜的大肠杆菌噬菌体原液，备用；3）制备含一定琼脂比例的半固体培养基；4）制备含步骤1）新鲜的大肠杆菌菌悬液的双层培养基，将双层培养基完全冷却凝固一段时间；5）将步骤2）新鲜的大肠杆菌噬菌体原液以气溶胶形式释放在密闭空间中，搅拌2‑5min后静置2‑5min；6）采集密闭空间中的大肠杆菌噬菌体气溶胶于步骤4）的双层培养基上；7）将采集到的大肠杆菌噬菌体气溶胶置于培养箱，正置培养后，计数培养后的噬菌斑。本发明设计合理，操作简便，高效稳定，适用于环境采样和消毒产品空间消毒效果检测领域。

主权项：1.一种大肠杆菌噬菌体气溶胶的采集方法，其特征在于，包括如下步骤：1制备新鲜的大肠杆菌菌悬液，备用；所述大肠杆菌菌悬液的浓度为1.0×109~1.0×1010CFUmL；2制备新鲜的大肠杆菌噬菌体原液，备用；所述噬菌体原液浓度为5.0×105~1.0×1010PFUmL；3制备含一定琼脂比例的半固体培养基，所述半固体培养基为半固体营养琼脂培养基或半固体胰蛋白胨大豆琼脂培养基；所述半固体培养基中琼脂比例为0.3%~0.8%；4制备含步骤1新鲜的大肠杆菌菌悬液的双层培养基，将双层培养基完全冷却凝固一段时间；所述双层培养基的制备方法：取步骤1新鲜的大肠杆菌菌悬液1mL于完全凝固的NA营养琼脂或TSA胰蛋白胨大豆琼脂平板上，并将步骤3含有一定琼脂比例的半固体培养基覆盖在NA营养琼脂或TSA胰蛋白胨大豆琼脂平板上面，摇匀静置；5将步骤2新鲜的大肠杆菌噬菌体原液以气溶胶形式释放在密闭空间中，搅拌2-5min后静置2-5min；6采用六级筛孔采样器采集密闭空间中的大肠杆菌噬菌体气溶胶于步骤4的双层培养基上,采集的采样体积为5~300L；7将采集到的大肠杆菌噬菌体气溶胶置于培养箱，正置培养后，计数培养后的噬菌斑。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广州市微生物研究所集团股份有限公司 一种大肠杆菌噬菌体气溶胶的采集方法

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