申请/专利权人：广州新鑫生物科技有限公司

申请日：2023-10-17

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN117904171A

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;C12N15/61;C12N15/55;C12N15/53;C12P33/20;A01H4/00;A01H5/06;A01H6/34

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.19#公开

摘要：本发明涉及一种利用毛状根高效合成罗汉果甜苷V的方法，属于生物技术领域。本发明运用了生物合成技术使毛状根高效合成罗汉果甜苷V，同时对毛状根的生长速率进行了调控，缩短了毛状根的生长周期，提高了生根率。本发明通过罗汉果甜苷V合成的关键酶基因转化到发根农杆菌Z20208中，由重组发根农杆菌Z20208去侵染罗汉果愈伤组织，诱导其长出毛状根后，将毛状根进行扩大培养并提取罗汉果甜苷V。该方法大大缩短了罗汉果甜苷V的生产周期，产量高，方法简单，环境友好，具有规模化生产甜苷V的应用前景。

主权项：1.本发明提出一种利用罗汉果毛状根高效制备罗汉果甜苷V的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：（1）克隆罗汉果甜苷V合成的关键酶编码基因——葫芦烯二醇合酶CBS基因、环氧化物水解酶EPH基因、细胞P450酶CYP87D18基因和NADPH细胞P450还原酶基因，并转化至发根农杆菌Z20208中形成重组发根农杆菌Z20208；（2）重组发根农杆菌Z20208进行预处理后，侵染罗汉果愈伤组织，将侵染的罗汉果愈伤组织接种到固体培养基上，经诱导产生毛状根，将固体培养得到毛状根转至液体培养基中，制备得到毛状根种子液；（3）毛状根种子液进行发酵，终止反应后离心，回收固体部分，并水提获得罗汉果甜苷V溶液，罗汉果甜苷V溶液经浓缩、干燥后制粉。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 广州新鑫生物科技有限公司 一种利用罗汉果毛状根高效制备罗汉果甜苷V的方法

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