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【发明授权】一种基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针及其重组质粒_大连理工大学_202211187520.9 

申请/专利权人:大连理工大学

申请日:2022-09-28

公开(公告)日:2024-04-19

公开(公告)号:CN115947866B

主分类号:C07K19/00

分类号:C07K19/00;C12N15/62;C12N15/85

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.04.19#授权;2023.04.28#实质审查的生效;2023.04.11#公开

摘要:本发明公开了一种基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针及其重组质粒,所述探针包含FRET荧光蛋白对ECFP与Ypet、可折叠蛋白序列接头、Paxillin蛋白的主要功能结构域序列以及Paxillin蛋白的底物蛋白Src关键结合序列Srchomology2domains,SH2五个部分。探针转染细胞后能够在活细胞内自行表达,通过两种荧光蛋白的FRET效率的变化定量地反映活细胞内Paxillin蛋白活性程度的变化。该生物探针具有对细胞毒性作用微小、使用简便、实时动态检测、检测结果直观、成本低等优点。

主权项:1.一种基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针,其特征在于,所述的基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针包括连接在可折叠蛋白接头两端的Paxillin蛋白功能结构域和SH2结合区,Paxillin蛋白功能结构域和SH2结合区分别连接FRET荧光蛋白对的两个蛋白;其中,可折叠蛋白接头的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示,核苷酸如SEQIDNO.8所示;Paxillin蛋白功能结构域的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示,核苷酸如SEQIDNO.6所示;SH2结合区的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,核苷酸如SEQIDNO.4所示;所述的基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示;所述的FRET荧光蛋白对为ECFP和YPet。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 大连理工大学 一种基于FRET的活细胞内Paxillin蛋白活性检测生物探针及其重组质粒

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