申请/专利权人：魏秀丽;山东省饲料兽药质量检验中心;山东迅达康兽药有限公司

申请日：2021-12-02

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN114235993B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/34;G01N30/74;G01N21/33

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.26#授权;2022.04.12#实质审查的生效;2022.03.25#公开

摘要：本发明涉及一种采用HPLC‑PDA检测板青败毒口服液中13种有效成分的方法，属于兽药中有效成分的检查方法。本发明采用反相高效液相色谱UPLC‑PDA分离技术，其中R，S‑告依春来检测板蓝根，大青叶；新绿原酸、单咖啡酰酒石酸、隐绿原酸、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸和4,5‑二‑O‑咖啡酰奎宁酸来检测金银花和蒲公英；连翘酯苷、连翘苷来检测连翘；芍药苷来检测赤芍；甘草酸和甘草苷来检测甘草。本发明通过一套液相色谱系统同时把13种目标化合物一次鉴别出来，方法简便快速、分离效果好，鉴别精度高，结果重现性好，易于观察，专属性强，色谱峰峰形良好，既达到中国兽药典的要求，还节省时间、试剂。

主权项：1.一种采用HPLC-PDA检测板青败毒口服液中13种有效成分的方法，其特征在于，（R，S）-告依春用于检测板蓝根，大青叶；新绿原酸、单咖啡酰酒石酸、隐绿原酸、绿原酸、咖啡酸、菊苣酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸用于检测金银花和蒲公英；连翘酯苷、连翘苷用于检测连翘；芍药苷用于检测赤芍；甘草酸和甘草苷用于检测甘草；所述方法包括下述步骤：第一步：供试品溶液的制备：取供试品至棕色容量瓶，加入溶剂，定容至25mL，振摇后超声提取20-40min，过滤，作为供试品溶液；第二步，对照品溶液的制备：各取（R，S）-告依春、新绿原酸、单咖啡酰酒石酸、隐绿原酸、绿原酸、芍药苷、咖啡酸、甘草苷、连翘酯苷、连翘苷、菊苣酸、4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和甘草酸对照品，分别加无水乙醇或甲醇或75%乙醇，制备对照品储备溶液；再取13种储备液混合，作为混合对照品储备溶液；第三步：液相色谱法：HPLC-PDA检测器；3D扫描波长：190-400nm，2D检测波长为240nm，230nm，251nm，327nm或330nm；色谱柱：英国ACEC18-AMIDE色谱柱，150*4.6mm粒径3μm；进样量1-5μL；柱温30-40度；流动相A相：甲醇；流动相B相：0.4%磷酸溶液；流速：0.72mLmin；梯度洗脱程序：0-16min，A相保持20%，B相保持80%；16-17min，A相由20%升至30%，B相由80%降至70%；17-25min，A相保持30%，B相保持70%25-28min，A相由30%升至33%，B相由70%降至67%；28-33min，A相保持33%，B相保持67%；33-43min，A相由33%升至45%，B相由67%降至55%；43-49min，A相保持45%，B相保持55%；49-52min，A相由45%升至75%，B相由55%降至25%；52-56min，A相保持75%，B相保持25%；56-58min，A相由75%降至20%，B相由25%升至80%；58-60min，A相保持20%，B相保持80%。

全文数据：

权利要求：

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