申请/专利权人：吉林大学

申请日：2022-02-24

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN114457050B

主分类号：C12N9/02

分类号：C12N9/02;C12Q1/26;G01N21/78

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.26#授权;2022.05.27#实质审查的生效;2022.05.10#公开

摘要：一种模拟天然漆酶活性的基于多肽纳米漆酶的福美双现场检测传感器及其制备方法，属于生物传感器技术领域。本发明以CuCl2与谷胱甘肽为原料通过水热法合成具有天然酶漆酶活性的多肽纳米酶。该多肽纳米酶在检测农药福美双的应用上具有很大的应用前景，在有福美双加入的情况下，多肽纳米酶对显色底物的吸附能力减弱，催化活性也降低，同时伴随着输出颜色的变化。本发明进一步构建了基于多肽纳米漆酶的福美双现场检测传感器和基于多肽纳米漆酶的福美双现场检测纸基比色传感器，具有携带方便、成本低廉等优势，能够对福美双进行现场检测，为食品安全和生命健康的便捷化检测提供了新的方法。

主权项：1.一种模拟天然漆酶活性的基于多肽纳米漆酶的福美双现场检测方法，其步骤如下：（1）将0.24mol・L-1的CuCl2水溶液2.5mL、0.12mol・L-1的谷胱甘肽水溶液5mL、N,N-二甲基甲酰胺溶液10.0mL以体积比1：2：4的比例混合均匀，然后将得到的混合物溶液转移到20mL聚四氟乙烯内衬的不锈钢反应釜中，在130~150oC下恒温反应4~5h；待反应釜冷却至室温后，将反应产物多次离心，再分别用N,N-二甲基甲酰胺溶液和去离子水洗涤3~5次；最后，将洗涤产物冷冻干燥，得到多肽纳米漆酶冻干粉末；再将得到的多肽纳米漆酶粉末用去离子水溶解，超声15~30min得到浓度为0.05~0.15mg・mL-1的多肽纳米漆酶溶液；（2）取25μL、浓度0.05~0.15mg・mL-1多肽纳米漆酶的去离子水溶液与50μL、浓度2.5~250μg・L-1福美双的丙酮溶液在37°C下反应20~30min；再加入100μL、1mg・mL-1的2,4-二氯苯酚水溶液，100μL、1mg・mL-1的4-氨基安替比林水溶液和100μLMES水溶液作为显色底物溶液，在50~70℃下反应40~80min；使用紫外分光光度计测量溶液在510nm处吸收光谱的峰值，建立“农药抑制率（AA0）与福美双浓度的关系曲线”；其中，农药抑制率（AA0）中的A是指在不同福美双浓度下溶液在510nm处吸收光谱的峰值，A0是指在福美双浓度为0的条件下溶液在510nm处吸收光谱的峰值；（3）实际测量时，取25μL、浓度为0.05~0.15mg・mL-1多肽纳米酶的去离子水溶液与50μL未知浓度的福美双溶液在37℃下反应20~30min；再加入100μL、1mg・mL-1的2,4-二氯苯酚水溶液，100μL、1mg・mL-1的4-氨基安替比林水溶液和100μL、pH=7.4、30mM的MES水溶液作为显色底物，在50~70℃下反应40~80min，使用紫外分光光度计测量溶液在510nm处的吸收光谱的峰值，将得到的农药抑制率（AA0）代入步骤（2）得到的“农药抑制率（AA0）与福美双浓度的关系曲线”，计算得到福美双浓度，从而实现对福美双的现场检测。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 吉林大学 基于多肽纳米漆酶的福美双现场检测传感器及其制备方法

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