申请/专利权人:中国科学院香港创新研究院再生医学与健康创新中心有限公司;中国科学院广州生物医药与健康研究院
申请日:2024-01-26
公开(公告)日:2024-04-30
公开(公告)号:CN117946972A
主分类号:C12N5/0783
分类号:C12N5/0783
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开
摘要:本发明涉及一种提高NK细胞分化效率的方法,涉及生物医药技术领域,包括如下步骤:第一阶段,分化形成中胚层;第二阶段,分化形成生血内皮细胞;第三阶段,分化形成造血干祖细胞;第四阶段,分化形成NK细胞:更换第四阶段诱导培养基,将所述造血干祖细胞与基质细胞进行共培养,诱导产生NK细胞;所述第四阶段诱导培养基包括DMEMF12、500‑4000mgL葡萄糖、FBS、GlutaMAXTM‑1、PS。本发明利用人多能干细胞来源的造血干祖细胞HSPC与基质细胞共培养进行NK分化,并通过调节第四阶段诱导培养基中的葡萄糖浓度来提高NK细胞分化效率,筛选出适合NK分化的最适葡萄糖浓度,进一步提高了NK细胞分化效率,并降低了生产成本。
主权项:1.一种提高NK细胞分化效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:1第一阶段,分化形成中胚层:取人多能干细胞,用第一阶段诱导培养基进行诱导分化,得到中胚层,所述第一阶段诱导培养基包括HDM、BMP4、ActivinA、bFGF、CHIR99021、A8-301、IWR-1-endo;2第二阶段,分化形成生血内皮细胞:更换第二阶段诱导培养基,培养所述中胚层,诱导得到生血内皮细胞;所述第二阶段诱导培养基包括HDM、VEGF、bFGF;3第三阶段,分化形成造血干祖细胞:更换第三阶段诱导培养基,培养所述生血内皮细胞,诱导得到悬浮的造血干祖细胞;所述第三阶段诱导培养基包括HDM、SCF、TPO、IL3、IL6;4第四阶段,分化形成NK细胞:更换第四阶段诱导培养基,将所述造血干祖细胞与基质细胞进行共培养,诱导产生NK细胞;所述第四阶段诱导培养基包括DMEMF12、500-4000mgL葡萄糖、FBS、GlutaMAXTM-1、PS。
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权利要求:
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