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【发明公布】一种多重荧光定量PCR检测奶牛乳房炎病原菌的引物探针组和检测方法_中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所_202410203556.4 

申请/专利权人:中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所

申请日:2024-02-23

公开(公告)日:2024-05-03

公开(公告)号:CN117965771A

主分类号:C12Q1/689

分类号:C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/445;C12R1/46;C12R1/22;C12R1/19;C12R1/37

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.05.21#实质审查的生效;2024.05.03#公开

摘要:本发明涉及分子生物学技术领域,具体为一种多重荧光定量PCR检测奶牛乳房炎病原菌的引物探针组,包括检测金黄色葡萄球菌的引物对一和探针一、检测无乳链球菌的引物对二和探针二、检测停乳链球菌的引物对三和探针三、检测大肠杆菌的引物对四和探针四、检测肺炎克雷伯菌的引物对五和探针五、检测奇异变形杆菌的引物对六和探针六;所述金黄色葡萄球菌序列如pMD‑19T‑nuc所示,所述无乳链球菌序列如pMD‑19T‑eftu所示,所述停乳链球菌序列如pMD‑19T‑tpch所示,所述大肠杆菌序列如pMD‑19T‑phoa所示,所述肺炎克雷伯菌序列如pMD‑19T‑rcsa所示,所述奇异变形杆菌序列如pMD‑19T‑urer所示。

主权项:1.一种多重荧光定量PCR检测奶牛乳房炎病原菌的引物探针组,其特征在于:包括检测金黄色葡萄球菌的引物对一和探针一、检测无乳链球菌的引物对二和探针二、检测停乳链球菌的引物对三和探针三、检测大肠杆菌的引物对四和探针四、检测肺炎克雷伯菌的引物对五和探针五、检测奇异变形杆菌的引物对六和探针六;所述金黄色葡萄球菌序列如pMD-19T-nuc所示,所述无乳链球菌序列如pMD-19T-eftu所示,所述停乳链球菌序列如pMD-19T-tpch所示,所述大肠杆菌序列如pMD-19T-phoa所示,所述肺炎克雷伯菌序列如pMD-19T-rcsa所示,所述奇异变形杆菌序列如pMD-19T-urer所示;其中,所述引物对一包括正向引物一Nuc-F和反向引物一Nuc-R,所述正向引物一Nuc-F、反向引物一Nuc-R、探针一Nuc-P序列如下:正向引物一Nuc-F:5’-CAGTGCAACTTCAACTAA-3’,反向引物一Nuc-R:5’-GTCTGAATGTCATTGTTTG-3’,探针一Nuc-P:5’-FAM-TTAACCGTATCACCATCAATCGCTT-BHQ1-3’,所述引物对二包括正向引物二Eftu-F和反向引物二Eftu-R,所述正向引物二Eftu-F、反向引物二Eftu-R、探针二Eftu-P序列如下:正向引物二Eftu-F:5’-ACTGGTGTTGAAATGTTC-3’,反向引物二Eftu-R:5’-CACGTTCGATTTCATCAC-3’,探针二Eftu-P:5’-VIC-AACACCACGAAGAAGAACACCAAC-BHQ1-3’,所述引物对三包括正向引物三Tpch-F和反向引物三Tpch-F,所述正向引物三Tpch-F、反向引物三Tpch-F、探针三Tpch-P序列如下:正向引物三Tpch-F:5’-TGCTCTTCATAACAATAATAAAC-3’,反向引物三Tpch-F:5’-CTGGAGGCGTAATATTAAC-3’,探针三Tpch-P:5’-CY5-TCGTTCTAACCAGTGACCGCA-BHQ2-3’,所述引物对四包括正向引物四Phoa-F和反向引物四Phoa-R,所述正向引物四Phoa-F、反向引物四Phoa-R、探针四Phoa-P序列如下:正向引物四Phoa-F:5’-GGCTTTCATGGTGTAGAA-3’,反向引物四Phoa-R:5’-CAGTGATGGTGATGAGTTA-3’,探针四Phoa-P:5’-FAM-CCGAAGAGGATTCACAAGAACATACC-BHQ1-3’,所述引物对五包括正向引物五Rcsa-F和反向引物五Rcsa-R,所述正向引物五Rcsa-F、反向引物五Rcsa-R、探针五Rcsa-P序列如下:正向引物五Rcsa-F:5’-GTGCATGATGATGAAAGTAA-3’,反向引物五Rcsa-R:5’-CGGTCAAAATGGATGTTC-3’,探针五Rcsa-P:5’-VIC-CATTATTCGCCAGATCATTACGCAA-BHQ1-3’,所述引物对六包括正向引物六Urer-F和反向引物Urer-R,所述正向引物六Urer-F、反向引物六Urer-R、探针六Urer-P序列如下:正向引物六Urer-F:5’-CCTGAGGTGGTTAAAACTA-3’,反向引物六Urer-R:5’-GACCCCTTCGTGATAAAC-3’,探针六Urer-P:5’-CY5-CGTTACTTCAGCAATGTCTACCGC-BHQ2-3’。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 一种多重荧光定量PCR检测奶牛乳房炎病原菌的引物探针组和检测方法

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