申请/专利权人：扬州大学

申请日：2023-09-25

公开（公告）日：2024-05-03

公开（公告）号：CN117210601B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/77

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.03#授权;2023.12.29#实质审查的生效;2023.12.12#公开

摘要：本发明公开了一种快速简便高通量鉴定小麦赤霉病抗性的方法，包括以下步骤：培养禾谷镰孢菌，并制备禾谷镰孢菌的孢子悬浮液；剪取小麦穗子，浸没于孢子悬浮液中，然后将充分沾有菌液的穗子置于培养箱内生长，生长后取出小麦穗子；将小麦穗子清洗，并提取DNA；用基于DNA的实时荧光定量PCR技术检测禾谷镰孢菌特有基因OSP24的量，通过计算禾谷镰孢菌OSP24基因量相对于小麦Actin基因量的比值，衡量禾谷镰孢菌在小麦穗内的生长量，进而判断小麦对禾谷镰孢菌的抗性。本发明能够快速高效地筛选出抗赤霉病的小麦材料，从而为筛选可供育种利用的小麦抗赤霉病种质资源以及定位、克隆抗赤霉病基因奠定基础。

主权项：1.一种快速简便高通量鉴定小麦赤霉病抗性的方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1，培养禾谷镰孢菌，并制备禾谷镰孢菌的孢子悬浮液；禾谷镰孢菌的孢子悬浮液中的孢子浓度为1×105个mL；步骤2，选取扬花期的小麦穗子，将其完全浸没在含有Tween-20的孢子悬浮液中，2min后，取出小麦穗子，基部置于装有水的容器中，用塑料袋将小麦穗子套住以保持湿度，置于培养箱中，不超过2d后，取出小麦穗子；步骤3，将小麦穗子清洗，并提取DNA；步骤4，用基于DNA的实时荧光定量PCR技术检测禾谷镰孢菌特有基因OSP24的量，设计针对OSP24基因的特异性引物，通过PCR技术得到OSP24基因的特异产物，以此来标记禾谷镰孢菌；所述针对OSP24基因的特异性引物如下：OSP24-DRT-F1（5′-CTCACAATGCCCTGGAAATAAAC-3′）；OSP24-DRT-R1（5′-CGAGCGGTAGCAAAGACAT-3′）；通过计算禾谷镰孢菌OSP24基因量相对于小麦Actin基因量的比值，衡量禾谷镰孢菌在小麦穗内的生长量，进而判断小麦对禾谷镰孢菌的抗性。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 扬州大学 一种快速简便高通量鉴定小麦赤霉病抗性的方法

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