申请/专利权人：北京基石生命科技有限公司

申请日：2019-04-11

公开（公告）日：2020-10-23

公开（公告）号：CN111808816A

主分类号：C12N5/09(20100101)

分类号：C12N5/09(20100101);C12N5/02(20060101);A01N1/02(20060101)

优先权：

专利状态码：失效-发明专利申请公布后的撤回

法律状态：2022.08.23#发明专利申请公布后的撤回;2020.11.10#实质审查的生效;2020.10.23#公开

摘要：本发明公开了一种用于培养胃癌实体瘤原代细胞的培养基。本发明提供了一种胃癌实体瘤原代细胞培养方法及配套试剂，本发明配制特殊的无血清培养基，利用悬浮培养体系对胃癌实体瘤来源的肿瘤细胞进行体外培养，保证癌细胞正常扩增的同时最大限度的排除正常细胞的干扰。利用本发明方法得到的胃癌原代细胞培养物可以用于多种细胞水平的体外实验、二代测序、构建动物模型、构建细胞系等等。可以预见，这种培养方法及本发明所提供的特殊培养基在胃癌的研究和临床诊断治疗领域具有广泛的应用前景。

主权项：1.一种用于培养胃癌实体瘤原代细胞的培养基，其特征在于：所述培养基由抗菌抗真菌剂三抗、HEPES、GlutaMax、人重组蛋白EGF、人重组蛋白bFGF、人重组蛋白HGF、人重组蛋白FGF-10、人重组蛋白R-spondin、人重组蛋白Wnt-3a、人重组蛋白Noggin、SB202190、A83-01、Primocin、N-乙酰-L-半胱氨酸、烟碱、N-2Supplement、霍乱毒素、B27、Y-27632、胃泌素和AdvancedDMEMF12培养基组成；其中，所述抗菌抗真菌剂三抗中的青霉素的终浓度为100-200UmL；所述抗菌抗真菌剂三抗中的链霉素的终浓度为100-200μgmL；所述抗菌抗真菌剂三抗中的两性霉素B的终浓度为250-250ngmL；所述HEPES的终浓度为8-12mM；所述GlutaMax的终浓度为0.8-1.2％体积百分含量；所述人重组蛋白EGF的终浓度为10-100ngmL；所述人重组蛋白bFGF的终浓度为10-50ngmL；所述人重组蛋白HGF的终浓度为5-25ngmL；所述人重组蛋白FGF-10的终浓度为5-25ngmL；所述人重组蛋白R-spondin的终浓度为250-500ngmL；所述人重组蛋白Wnt-3a的终浓度为200-300ngmL；所述人重组蛋白Noggin的终浓度为100-200ngmL；所述SB202190的终浓度为5-10μM；所述A83-01的终浓度为0.25-1.25μM；所述Primocin的终浓度为1％体积百分含量；所述N-乙酰-L-半胱氨酸的终浓度为0.5-2mM；所述烟碱的终浓度为5-10mM；所述N-2Supplement的终浓度为1％体积百分含量；所述霍乱毒素的终浓度为0.1-1nM；所述B27的终浓度为1.5-2.5％体积百分含量；所述Y-27632的终浓度为5-20μM；所述胃泌素的终浓度为5-20nM；余量均为AdvancedDMEMF12培养基。

全文数据：

权利要求：

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