申请/专利权人：黄俊文

申请日：2016-05-09

公开（公告）日：2021-02-09

公开（公告）号：CN107354193B

主分类号：C12P39/00(20060101)

分类号：C12P39/00(20060101);C12P1/04(20060101);C12P1/02(20060101);C12R1/465(20060101);C12R1/245(20060101);C12R1/02(20060101);C12R1/865(20060101);C12R1/125(20060101);C12R1/01(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.02.09#授权;2017.12.12#实质审查的生效;2017.11.17#公开

摘要：本发明公开了一种培养基的复制方法，其步骤包含：预先混合培养基原液并抽取部分原液至新桶；于新桶内加入糖蜜及水后拌匀；于马铃薯疮痂病菌、干酪乳酸菌、木质醋酸菌、酿酒酵母、枯草杆菌及双歧杆菌菌种中，取其中五种菌种分别倒入玻璃瓶再加入水后均匀摇晃，直至产生气泡为止；将上述五种菌种由各玻璃瓶内取出部分置入一容器内，且均匀摇晃直至产生气泡为止，并于静置适当时间后倒入该新桶；将具特定需求功能的菌种倒入该新桶，并拌匀、曝气以完成新桶培养基；再次将具特定需求功能的菌种倒入该新桶培养基，并拌匀、曝气以完成酵素成品。

主权项：1.一种培养基的复制方法，其特征在于，包含下述a～g步骤︰a依总重量比例取水40～60％、糖蜜10～30％后拌匀，再取马铃薯疮痂病菌Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌Acetobacterxylinum、酿酒酵母Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌Bacillussubtilis及双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum菌株，且于每一菌株加水调整为占总重量4～6％后加入，接着曝气180天，得到培养基原液；b抽取部分该培养基原液至新桶，并使该培养基原液占该新桶内物质总重量的50％；c于该新桶内加入占新桶内物质总重量10～30％的糖蜜及20～40％的水后均匀搅拌；d于马铃薯疮痂病菌Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌Acetobacterxylinum、酿酒酵母Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌Bacillussubtilis及双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum菌种中，取其中五种菌种各40～60ML，并分别倒入玻璃瓶内，再加入400～600ML的水后均匀摇晃，直至产生气泡为止；e将步骤d所取用的五种菌种由各玻璃瓶内取出500ML置入一容器且均匀摇晃直至产生气泡为止，并静置1～2小时后倒入该新桶；f将步骤d尚未被取用的菌种100～300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气90天以完成新桶培养基；新桶培养基则能再次一分为二，以一部分添加具需求功能的菌种后制造酵素成品，另一部分则作为培养基以续行复制动作，而能不断复制培养基以制造酵素成品；以及g再将步骤f所取用的菌种100～300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气90天以完成酵素成品。

全文数据：培养基的复制方法技术领域[0001]本发明涉及一种酵素培养基，特别涉及一种能缩短培养时间并产出培养基及酵素成品的培养基复制方法。背景技术[0002]酵素是通过益生菌作用将食物分解为氨基酸、维生素及矿物质等易吸收的小分子物质，且能消化食物、修复组织，催动细胞使其正常运作，为具有特殊生物活性并维持生命活动的必要物质，同时也是生物进行化学反应与新陈代谢的催化剂。当酵素于人体内进行化学变化时会不断损耗，因此，除了通过肝脏、胰脏自行分泌外，亦需借由日常食物中摄取及补充。[0003]目前，于科技的进步下，酵素已能通过培养方式进行量产，以利用酵素产品中的益菌群对人体发挥效用。此外，酵素除使用于食品外，目前亦广泛应用于洗衣精、洗碗精、牙膏等洗净或除臭产品上，而能借微生物降解以达成去污及除臭的效果，且能取代具化学成份的洗净产品，提升环保效益。[0004]而酵素产出方式虽能通过水果与蔬菜自然发酵，然而，自然发酵耗时长，且容易因感染杂菌而造成酵素变质或功效特征不明显等情况，因此，产出率不高且稳定性不佳。[0005]另外，通过培养方式可针对不同功能及诉求进行培养，其是通过固态或液态培养基以提供菌种所需的营养物质，待菌种发酵后生长出菌株，并依不同菌种使酵素具有不同功效。然而，酵素培养过程中仍可能受到设备、环境及培养方式影响，因此，如何培养、操作使微生物适当发酵，是酵素制造与产出的关键。发明内容[0006]为了解决现有技术中存在的自然发酵耗时长，且易因感染杂菌而造成时间与成本的浪费等问题，本发明提出了一种培养基的复制方法，通过该方法来产出培养基及酵素成品，能有效缩短再次培养的时间并简化制程。[0007]为了达到上述目的，本发明采用了以下技术手段：[0008]本发明提供的一种培养基的复制方法，该方法包含下述a〜g步骤：[0009]a依总重量比例取水40〜60%、糖蜜10〜30%后拌匀，再取马铃薯疮痂病菌Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌（Lactobacilluscasei、木质醋酸菌Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌（Bacillus311131：；[113及双歧杆菌8丨11£10^0丨61^1»111^£丨111111菌株，且于每一菌株加水调整为占总重量4〜6%后加入，接着曝气180天，得到培养基原液；[0010]b抽取部分该培养基原液至新桶，并使该培养基原液占该新桶内物质总重量的50%；[0011]C于该新桶内加入占新桶内物质总重量10〜30%的糖蜜及20〜40%的水后均勾搅拌；[0012]d于马铃薯疮痂病菌（streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌（Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌Bacillus311131:：[1丨3及双歧杆菌81;£11^3^61^111111^;^111111菌种中，取其中五种菌种各40〜60ML，并分别倒入玻璃瓶内，再加入400〜600ML的水后均匀摇晃，直至产生气泡为止；[0013]e将步骤d所取用的五种菌种由各玻璃瓶内取出500ML置入一容器且均匀摇晃直至产生气泡为止，并静置1〜2小时后倒入该新桶；[0014]f将步骤d尚未被取用的菌种100〜300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气90天以完成新桶培养基；以及[0015]g再将步骤f所取用的菌种1〇〇〜300ML倒入该新桶培养基，并拌匀、曝气90天以完成酵素成品。[0016]在本发明中，优选的，该酵素成品为液态，并依据该步骤g所取用的菌种种类赋予该酵素成品功效，且能稀释或加工成粉末状。[0017]综上，采用本发明的方法，能通过上述步骤来形成新桶培养基，再将新桶培养基一分为二，而能一部分添加特定菌种培养以制成并量产酵素成品，并利用另一部分续行培养基的复制动作，而能不断复制培养基以制造酵素成品，并藉此简化制程，节省成本与时间。附图说明[0018]图1为本发明培养基复制的流程图；[0019]图2为本发明培养基原液的制造流程图；[0020]图3为本发明培养基复制的示意图。[0021]符号说明：[0022]S11依重量比例取水40〜60%、糖蜜10〜30%后拌匀[0023]S12取马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌（Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌（Bacillussubtilis及双歧杆菌（Bifidobacteriumbifidum菌株，且于每一菌株加水调整为占总重量4〜6%后加入[0024]S13曝气观察[0025]S14形成培养基原液[0026]S21预先混合培养基原液[0027]S22抽取部分该原液至新桶，并使该原液占该新桶内物质总重量50%[0028]S23于该新桶内加入占新桶内物质总重量10〜30%的糖蜜及20〜40%的水后均匀搅拌[0029]S24于马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌（Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌Bacillussubtilis及双歧杆菌（Bifidobacteriumbifidum菌种中，取其中五种菌种各40〜60ML并分别倒入玻璃瓶再加入400〜600ML的水后均匀摇晃，直至产生气泡为止[0030]S25将上述五种菌种由各玻璃瓶内取出500ML置入一容器且均匀摇晃直至产生气泡为止，并静置适当时间后倒入该新桶[0031]S26将步骤S24尚未被取用的菌种100〜300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气以完成新桶培养基[0032]S27再将步骤S26所取用的菌种100〜300ML倒入该新桶培养基，并拌匀、曝气以完成酵素成品具体实施方式[0033]为使本领域技术人员了解本发明欲达成目的所运用的技术、手段及功效，下面举一较佳实施例并配合图式，详细说明如后：[0034]首先，请参阅附图1所示，为本发明培养基复制的流程图，该培养基的复制方法包含下述步骤：[0035]S21预先混合培养基原液；[0036]S22抽取部分该原液至新桶，并使该原液占该新桶内物质总重量50%;[0037]S23于该新桶内加入占该新桶内物质总重量1〇〜30%的糖蜜及20〜40%的水后均匀搅拌；[0038]S24于马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌（Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌Bacillussubtilis及双歧杆菌（Bifidobacteriumbifidum菌种中，取其中五种菌种各40〜60ML，并分别倒入玻璃瓶内，再加入400〜600ML的水后均匀摇晃，直至产生气泡为止；[0039]S25将上述菌种由各玻璃瓶内取出500ML置入一容器且均匀摇晃直至产生气泡为止，并静置适当时间后倒入该新桶；[0040]S26将步骤S24尚未被取用的菌种1〇〇〜300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气以完成新桶培养基;以及[0041]S27再将步骤S26所取用的菌种100〜300ML倒入该新桶培养基，并拌匀、曝气以完成酵素成品。[0042]其次，请仍然参阅附图1并配合附图2所示，于本发明的一实施例中，上述步骤S21的培养基原液的制备，包含下述步骤：[0043]S11依重量比例取水40〜60%、糖蜜10〜3〇%后拌匀；[0044]S12取马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌^61；^3^6^丫1：11111111、酿酒酵母（3；：113：1"01117〇63cerevisiae、枯草杆菌（Bacillussubtilis及双歧杆菌（Bifidobacteriumbifidum菌株，且于每一菌株加水调整为占总重量4〜6%后加入；[0045]S13曝气观察，优选的，其曝气时间为180天；以及[0046]S14形成培养基原液。[0047]接着，步骤S22抽取部分培养基原液倒入新桶，并使该原液占新桶内物质总重量50%，再于新桶内加入占新桶内物质总重量10〜3〇%的糖蜜及20〜40%的水后均匀搅拌步骤S23，优选的，新桶内的培养基原液、糖蜜及水的比例为5:2:3。[0048]而步骤S24是于马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌Lactobacilluscasei、木质醋酸菌（Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌（Bacillussubtilis及双歧杆囷（Bifidobacteriumbifidum菌种中，扣除所欲强调功效的菌种而取其中五种菌种；其中，马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies能分解有机质、分泌抗生物质，而具有抑制病害的功效；干酪乳酸菌Lactobacilluscasei能合成维生素及蛋白质，且具耐酸、能通过胃酸胆碱、具强力整肠效能以及能帮助消化吸收的特性;木质醋酸菌Acetobacterxylinum为能生产纯纤维素的细菌，并能发酵蔬果产生二次代谢产物，以作为悬浮剂或调稠剂添加于食品中，且具有制造养分、整肠道的功效;酿酒酵母Saccharomycescerevisiae能合成不同蛋白质及维他命，为制作培养基常用成分酵母提取物的主要原料;枯草杆菌Bacillussubtilis能抑制病毒、强化免疫功能，并能用于种子保护与生物防治上；而双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum为人体肠道最优势的益菌，能帮助人体合成维他命以促进营养吸收，并能增加免疫力，减少抗生素危害。于本实施例中，若欲制造能合成维他命、促进营养吸收、增加免疫力及减少抗生素危害的酵素成品，则扣除双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum后，取其余五种菌种各40〜60ML，并分别倒入玻璃瓶再加入400〜600ML的水，接着均匀摇晃直至产生气泡为止，再将上述五种菌种由各玻璃瓶内分别取出500ML置入一容器，使五种菌种混合并再次均匀摇晃直至产生气泡为止，待静置1〜2小时后倒入该新桶步骤S25。[0049]步骤S26，于新桶内加入100〜300ML的双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum菌种并均匀搅拌，且每天曝气观察90天以完成新桶培养基;此时，该新桶培养基能于取出部分原液后，再次加入1〇〇〜300ML的双歧杆菌Bifidobacteriumbifidum菌种并均勾搅梓，且每天曝气观察90天即完成具预定功效的酵素成品步骤S27，优选的，该酵素成品为液态，并能稀释或加工成粉末状，且能利用另一部分新桶培养基续行培养基的复制与制作酵素成品的动作。[0050]藉此，能将培养基原液一分为二配合参阅附图3，再通过上述步骤加入菌种并曝气观察以元成新桶培养基的制备，而新桶培养基则能再次一分为二，以一部分添加具需求功能的菌种后制造酵素成品，另一部分则作为培养基以续行复制动作，而能不断复制培养基以制造酵素成品，并能简化制程，达到节省再次配制培养基的人力与时间成本的功效。[0051]以上这些实施例仅是范例性的，并不对本发明的范围构成任何限制。本领域技术人员应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围下可以对本发明技术方案的细节和形式进行修改或替换，但这些修改和替换均落入本发明的保护范围内。

权利要求：1.一种培养基的复制方法，其特征在于，包含下述a〜g步骤：a依总重量比例取水40〜60%、糖蜜10〜30%后拌匀，再取马铃薯疮痂病菌Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌（Lactobacilluscasei、木质醋酸菌Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌（Bacillus311131：；[113及双歧杆菌]5丨；1^1^8^61'；[11111131；1^111111菌株，且于每一菌株加水调整为占总重量4〜6%后加入，接着曝气180天，得到培养基原液；b抽取部分该培养基原液至新桶，并使该培养基原液占该新桶内物质总重量的5〇%;c于该新桶内加入占新桶内物质总重量10〜30%的糖蜜及20〜40%的水后均勾搅拌；d于马铃薯疮痂病菌（Streptomycesturgidiscabies、干酪乳酸菌（Lactobacilluscasei、木质醋酸菌（Acetobacterxylinum、酿酒酵母（Saccharomycescerevisiae、枯草杆菌Bacillussubtilis及双歧杆菌1^;1^1^8^6；1：;[11111131;^111111菌种中，取其中五种菌种各40〜60ML，并分别倒入玻璃瓶内，再加入400〜600ML的水后均匀摇晃，直至产生气泡为止；e将步骤d所取用的五种菌种由各玻璃瓶内取出500ML置入一容器且均匀摇晃直至产生气泡为止，并静置1〜2小时后倒入该新桶；f将步骤d尚未被取用的菌种100〜300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气9〇天以完成新桶培养基；以及g再将步骤f所取用的菌种100〜300ML倒入该新桶，并拌匀、曝气9〇天以完成酵素成品。2.根据权利要求1所述的培养基的复制方法，其特征在于，该酵素成品为液态，并依据该步骤g所取用的菌种种类赋予该酵素成品功效，且能稀释或加工成粉末状。

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