申请/专利权人：中国农业科学院农业基因组研究所

申请日：2020-10-22

公开（公告）日：2021-02-12

公开（公告）号：CN112359092A

主分类号：C12Q1/6806(20180101)

分类号：C12Q1/6806(20180101);C12N15/10(20060101);C12N15/66(20060101);C40B50/06(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.19#授权;2021.03.05#实质审查的生效;2021.02.12#公开

摘要：本发明涉及生物工程领域，具体地，涉及一种基因组短片段文库的构建方法。本发明包括以下步骤：S1、细胞全基因组提取；S2、基因组片段化和产物回收纯化；S3、MNase酶切和产物回收；S4、电泳和胶回收；S5、末端修复和接头连接；S6、载体克隆与文库构建。本发明通过无序列偏好性的酶切方法富集得到的15‑50bp长度的短片段DNA文库涵盖了动物全基因组的完整信息，该方法操作简便，技术体系稳定，为调控元件基序的序列信息解析提供了便利。

主权项：1.一种基因组短片段文库的构建方法，包括以下步骤：S1、细胞全基因组提取；S2、基因组片段化和产物回收纯化：将步骤S1提取出的全基因组打断并回收打断产物；S3、MNase酶切和产物回收：将步骤S2的打断产物进行MNase酶切并回收酶切产物；S4、电泳和胶回收：将步骤S3的酶切产物进行电泳，切割15-50bp范围的片段回收；S5、末端修复和接头连接：将步骤S4回收得到的DNA片段进行末端修复加A，然对末端修复后的DNA片段进行adapter连接，获得adapter连接产物；S6、载体克隆与文库构建：将步骤S5获得adapter连接产物添加载体同源臂然后进行载体克隆，获得重组产物，将重组产物转化培养后提取重组质粒，以重组质粒为模板进行扩增，以扩增后产物作为inputDNA进行DNA测序文库的构建。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国农业科学院农业基因组研究所 一种基因组短片段文库的构建方法

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