【发明公布】AAV组合物、制造方法和使用方法_夜星克有限公司_201980037670.1 

申请/专利权人:夜星克有限公司

申请日:2019-04-05

发明/设计人:R·特鲁拉恩;T·昂吉;V·吉拉德

公开(公告)日:2021-02-19

代理机构:北京律盟知识产权代理有限责任公司

公开(公告)号:CN112384626A

代理人:范海云

主分类号:C12N15/864(20060101)

地址:英国伦敦

分类号:C12N15/864(20060101);A61K48/00(20060101);C12N9/10(20060101);A61K38/45(20060101)

优先权:["20180405 US 62/653,139","20181017 US 62/746,980","20181130 US 62/773,975"]

专利状态码:在审-公开

法律状态:2021.02.19#公开

摘要:本发明公开了用于自哺乳动物宿主细胞培养纯化重组AAVrAAV粒子的方法。本公开还提供本公开的方法所产生的药物组合物、药物组合物和使用本文描述的药物组合物治疗疾病的方法。

主权项:1.一种用于自哺乳动物宿主细胞培养纯化重组AAVrAAV粒子的方法,其包括下列步骤:a在适合形成多个rAAV粒子的条件下,在培养基中培养多个哺乳动物宿主细胞,其中所述多个哺乳动物宿主细胞已用包含外源性序列的质粒载体、辅助质粒载体和包含编码病毒Rep蛋白和病毒Cap蛋白的序列的质粒载体转染以产生多个转染的哺乳动物宿主细胞;b收集包含所述多个转染的哺乳动物宿主细胞的所述培养基;c自所述多个转染的哺乳动物宿主细胞收集多个rAAV粒子;d通过切向流过滤TFF浓缩所述多个rAAV粒子以产生浓缩的多个rAAV粒子;e通过密度梯度超离心富集所述浓缩的多个rAAV粒子的完整rAAV粒子以产生富集的多个完整rAAV粒子;f通过阴离子交换AEX色谱或亲和性色谱纯化所述富集的多个完整rAAV粒子以产生包含纯化且富集的多个完整rAAV粒子的洗脱液;和g通过切向流过滤TFF渗滤和浓缩所述来自f的洗脱液至制剂缓冲剂以产生包含所述纯化且富集的多个完整rAAV粒子和所述制剂缓冲剂的最终组合物。

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权利要求:

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