申请/专利权人：嘉必优生物技术(武汉)股份有限公司

申请日：2018-12-29

公开（公告）日：2021-04-13

公开（公告）号：CN109456903B

主分类号：C12N1/14(20060101)

分类号：C12N1/14(20060101);C12P23/00(20060101);C12R1/645(20060101)

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2021.04.13#授权;2019.04.05#实质审查的生效;2019.03.12#公开

摘要：本发明公开了一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品及其发酵方法，涉及富硒发酵技术领域。本发明公开的富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的制备方法其包括：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐。该制备方法可以制得富含硒元素和类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌；该方法通过优化发酵方法条件，在培养三孢布拉氏霉的过程中加入硒盐，三孢布拉氏霉生长时吸收利用了硒，使硒与三孢布拉氏霉体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，提高了硒在三孢布拉氏霉菌体内的含量。

主权项：1.一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的发酵方法，其特征在于，其包括：发酵步骤：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐；在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌；在发酵0-60h内往所述发酵培养基中添加富硒助剂，富硒助剂为十二烷基磺酸钠或环己氨基磺酸钠；所述三孢布拉氏霉正菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014378；所述三孢布拉氏霉负菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014379。

全文数据：富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品以及发酵方法技术领域本发明涉及富硒发酵技术领域，具体而言，涉一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌、类胡萝卜素发酵制品以及发酵方法。背景技术硒Se被世界卫生组织和中华医学会定为21世纪继碘、锌后必补的第三大微量营养保健元素，它对人体具有抗氧化、防癌变、排毒、提高免疫力等作用。类胡萝卜素carotenoids是一类重要的天然色素的总称,普遍存在于动物、高等植物、真菌、藻类的黄色、橙红色或红色的色素之中。类胡萝卜素是体内维生素A的主要来源,同时还具有抗氧化、免疫调节、抗癌、延缓衰老等功效。Β-胡萝卜素C40H56是类胡萝卜素之一，也是橘黄色脂溶性化合物，它是自然界中最普遍存在也是最稳定的天然色素。β—胡萝卜素是一种抗氧化剂，具有解毒作用，是维护人体健康不可缺少的营养素，在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化上有显著的功能，并进而防止老化和衰老引起的多种退化性疾病。番茄红素也是一种非常重要的类胡萝卜素，其具有优越的生理功能，它不仅具有抗癌抑癌的功效，而且对于预防心血管疾病、动脉硬化等各种成人病、增强类胡萝卜素。三孢布拉氏霉可以产β-胡萝卜素，也可以通过番茄红素环化酶抑制剂阻断番茄红素转化为β-胡萝卜素路径实现番茄红素的累积，是目前可以实现工业化生产的唯一一种产β胡萝卜素和番茄红素菌种我们研究显示，三孢布拉氏霉具有一定的富硒能力，对化学硒的耐受能力较高，但是普通三孢布拉氏霉的硒转化能力较弱，一般想要得到高富硒能力的霉菌需要通过筛选驯化得到富硒三孢布拉氏霉，但筛选驯化需要花大量的时间人力。鉴于此，本发明希望通过改善富硒工艺来提高三孢布拉氏霉的富硒能力。发明内容本发明的目的在于提供一种富硒富类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌的发酵方法，该发酵方法可以制得富含硒元素和类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌。本发明的另一目的在于提供一种富硒富类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌，该霉菌富含硒元素和类胡萝卜素。本发明的另一目的在于提供一种类胡萝卜素发酵制品，该发酵制品中具有较高含量的类胡萝卜素和硒元素。本发明是这样实现的：一方面，本发明提供了一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的发酵方法，其包括：发酵步骤：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐；在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌；进一步地，在本发明的一些实施方案中，在发酵的第0-60h添加所述硒盐。进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述硒盐的添加量为2-100mgL；优选的，所述硒盐的添加量为5-30mgL。进一步地，在本发明的一些实施方案中，所述硒盐的添加方式是一次性加入、分批加入或流加；优选的，在发酵第18-36h，添加所述硒盐。进一步地，在本发明的一些实施方案中，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入所述硒盐；优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体。优选的，富集可以采用离心、过滤等方式来实现。进一步优选的，在一些实施例中富集三孢布拉氏霉的设备采用富集与发酵为一体的发酵罐，结构如附图1-2所示，发酵培养基由补料口1进入罐体，落到5阀体上，发酵培养基由阀板上的孔流下，可由出料口10排出，菌体留在5的阀板上完成富集，启动气动机构6翻转阀体180°，菌体面朝下，可再由补料口加入培养液，菌体随着培养液冲下，落入罐体内，可进行下一步的高密度培养或者富集培养工作。此发酵罐能够保证富集操作期间无染菌风险，并且能够在完全不影响菌体生长的情况下，实现前序发酵至富集再至高密度发酵、富集培养整个连续不间断的功能。由于无机硒对细胞具有一定的毒性，高浓度的无机硒会抑制菌体生长代谢，发明人发现在加入无机硒前将菌体进行富集，在保证高富硒能力的同时，能够减少单位细胞吸收的硒量，进而降低无机硒对菌体的毒性。进一步地，在本发明的一些实施方案中，在发酵的第0-60h往所述发酵培养基中添加富硒助剂，优选的，富硒助剂为十二烷基磺酸钠SDS或环己氨基磺酸钠甜蜜素。优选的，富硒助剂的添加量0.01-1gL；优选的，富硒助剂地添加量为0.1-0.5L。优选的，富硒助剂的添加方式为一次性加入、分批加入或流加。优选的，在发酵第18-36h添加富硒助剂。优选的，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入富硒助剂。优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入富硒助剂。优选的，添加富硒助剂的时间和方式与添加硒的时间和方式相同。即在添加硒盐的同时添加富硒助剂。发明人意外的发现添加富硒助剂能够提升硒的富集量，其原因可能是在富硒的过程中主要起到提供了有机硫来源的作用，从而能够提高甲硫氨酸的表达量，进一步提高硒与甲硫氨酸的结合，进而提高富硒效果。我们选择的助剂主要为十二烷基磺酸钠和环己氨基磺酸钠。环己氨基磺酸钠作为食品生产中常用的添加剂，具有较高的安全性。十二烷基磺酸钠除了具备有机硫来源的作用还能够解决供氧问题，三孢布拉氏霉对需氧的要求非常高，添加SDS可以利用其作为氧载体，加强三孢布拉氏霉的供氧，从而提升三孢布拉氏霉的生长状况，进而提高三孢布拉氏霉的富硒效果。进一步地，在本发明的一些实施方案中，在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌。进一步地，在本发明的一些实施方案中，在发酵步骤中，所述发酵培养基包括葡萄糖8-12gL，玉米淀粉28-32gL，玉米浆干粉48-52gL，磷酸二氢钾0.8-1.2gL，硫酸镁0.08-0.12gL以及葵花籽油38-42gL，pH6.8-7.2。进一步地，在本发明的一些实施方案中，上述硒盐选自2-羟基-4甲基硒代丁酸或其盐、亚硒酸盐、硒酸、硒酸盐、硒代半胱氨酸、硒代甲硫氨酸、硒代胱硫醚、硒代高半胱氨酸和Se-腺苷硒代甲硫氨酸中的任意一种或几种的组合，优选的硒盐采用亚硒酸钠。本发明提供的富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的制备方法，通过优化发酵工艺条件，在培养三孢布拉氏霉的过程中加入硒盐，三孢布拉氏霉生长时吸收利用了硒，使硒与三孢布拉氏霉体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，从而消除了化学硒如亚硒酸钠对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。其中在发酵的48-58h之间添加阻断剂例如茶碱、烟碱、咪唑0.1～0.15％，即可得到富硒富含番茄红素的三孢布拉氏霉。不添加阻断剂，即可得到富硒富β胡萝卜素的三孢布拉氏霉。另外，还可以通过改变阻断剂的添加时间和添加量，例如将阻断剂的添加时间延后，或者减小阻断剂的添加量，使番茄红素环化酶未完全失活得到富硒又同时富含β胡萝卜素和番茄红素的三孢布拉氏霉。在本发明一个优选的方案中，所述三孢布拉氏霉正菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014378；所述三孢布拉氏霉负菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014379。其中，三孢布拉氏霉正菌于2014年8月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号：CCTCCNO:M2014378，分离学命名：Blakesleatrispora。三孢布拉氏霉负菌于2014年8月8日保藏于中国典型培养物保藏中心，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号：CCTCCNO:M2014379，分离学命名：Blakesleatrispora。另一方面，本发明提供了一种富硒富类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌，其由上述的方法制得。需要注意的是，该霉菌可以视为放罐后发酵培养基中的菌体，也可以为过滤菌体后进行干燥的含油干菌体。本发明提供的富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌，其不仅含有类胡萝卜素，其还富含硒元素，其与三孢布拉氏霉体内的蛋白质和多糖有机结合转化为生物硒，消除了化学硒如亚硒酸钠对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。其中类胡萝卜素可以是β-胡萝卜素，也可以发酵过程中添加阻断剂后得到的番茄红素，也可以番茄红素环化酶未完全失活下产生的β-胡萝卜素与番茄红素共存的情况。另一方面，本发明提供了一种类胡萝卜素发酵制品，该发酵制品含类胡萝卜素和硒元素。需要注意的是，该发酵制品可以为放罐后的发酵培养基，也可以为过滤菌体后进行干燥的干菌体。进一步地，在本发明的一些实施方案中，每克该发酵制品中硒含量不少于0.016mg。优选的，在本发明的一些实施方案中，每克该发酵制品中硒含量可达到0.082mg。进一步地，在本发明的一些实施方案中，每克该发酵制品中类胡萝卜素含量不少于0.063g。优选的，在本发明的一些实施方案中，每克该发酵制品中硒含量可达到0.075g.本发明提供的类胡萝卜素发酵制品，不仅富含类胡萝卜素，还富含有机硒。该类胡萝卜素发酵制品消除了化学硒如亚硒酸钠对人体的毒副反应和肠胃刺激，使硒能够更高效、更安全地被人体吸收利用。附图说明为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本发明的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为本发明实施例中发酵罐的结构示意图。图2为图1中A-A的剖面图。附图标记：1-补料口；2-检修口；3-出气口；4-罐体；5-过滤阀门组件；6-气动执行机构；7-进气口；8-气体分布盘；9-裙座；10-出料口；11-密封圈；12-过滤孔；13-阀板；14-阀座。具体实施方式为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1本实施例提供的发酵制备富硒富类β-胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌的方法如下：菌种：三孢布拉氏霉菌BlakesleatrisporaBT7251+保藏编号为CCTCCNO:M2014378，三孢布拉氏霉菌BlakesleatrisporaBT7603-保藏编号为CCTCCNO:M2014379。1斜面培养：取三孢布拉氏霉菌正菌和三孢布拉氏霉菌负菌的孢子悬液，分别涂布于PDA斜面培养基上，于25℃恒温培养箱中培养5天。所用斜面培养基包括gL：葡萄糖20gL，琼脂粉25gL，去皮土豆200gL；其配制方法可参考如下：将土豆切成1cm方块加入去离子水煮沸30分钟，冷却后用四层纱布过滤，取过滤后的清液加入葡萄糖和琼脂粉即可。2种子培养：分别从三孢布拉氏霉菌正、负菌株的PDA斜面培养基上用接种铲铲取一铲的正菌、负菌，再分别接种到含有150ml种子培养基的1000ml三角瓶中，于25℃，180转分钟条件下培养48小时，得到三孢布拉氏霉菌正菌种子液和三孢布拉氏霉菌负菌种子液。所用种子培养基包括gL：葡萄糖10gL，玉米淀粉30gL，玉米浆干粉50gL，磷酸二氢钾1gL，硫酸镁0.1gL，pH7.0。3发酵：三孢布拉氏霉菌正菌种子液和三孢布拉氏霉菌负菌种子液，按照正、负菌菌体质量比为1:1混合均匀，得到种子液混合液，以10％体积比接种量将该种子液混合液接入此时记为发酵第0h装有初始发酵培养基中试发酵罐，于25℃，180rpm条件下进行发酵培养。发酵培养基包括：葡萄糖10gL，玉米淀粉30gL，玉米浆干粉50gL，磷酸二氢钾1gL，硫酸镁0.1gL，葵花籽油40gL，pH7.04补加硒盐在发酵第24h，发酵培养基进入富集发酵罐结构参考后文描述完成菌体富集操作，同时再加入原发酵培养基体积的五分之一的新鲜发酵培养基成分相同，再加入10mgL的亚硒酸钠，继续发酵。值得注意的是，本实施例是采用富集发酵罐，添加的新鲜发酵培养基，但是某些实施方案中可以富集时留存全部菌体并保留原体积的五分之一的培养基。本实施例所用的富集发酵罐的结构描述如下：参考图1和图2，本发明提供一种发酵罐，包括：罐体4和过滤阀门组件5，过滤阀门组件5具体可采用卫生级蝶阀，质量可靠，且保证发酵罐内物料的卫生。罐体4的顶部设有补料口1、出气口3和检修口2，罐体4的底部设有进气口7和出料口10，过滤阀门组件5将罐体4分隔为上下两部分，利用过滤阀门组件5将发酵培养基过滤并使菌体分离。检修口2用于维修人员进入罐体4内对设备进行维修和保养。进气口7和出气口3作为罐体4内的气体通道，方便为罐体内的菌体提供氧气或其他的反应气体。其中，过滤阀门组件5包括阀座14和阀板13，阀座14为圆环形结构，阀板13为圆盘形结构，阀座14套装在罐体4的侧壁，相当于将罐体14的侧壁分为上下两段；阀板13套装在阀座4内，并可绕阀座14的径向上下反转，阀板13上设有多个过滤孔12，过滤孔12用于将发酵培养基中的菌体富集在阀板上，过滤后的发酵培养基通过出料口10排出发酵罐。当然，为了提高过滤的效率，多个过滤孔12均匀分布在阀板13上，过滤孔的孔径具体根据需要过滤的菌体大小进行设置。为了实现阀板13的自动控制，在罐体4的侧壁上装设有气动执行机构6，气动执行机构6与阀板13连接，用于带动阀板13上下翻转。具体地，阀座14内沿其径向穿设有转轴，阀板13固定装设在转轴上，具体为转轴穿过阀板的径向中心，转轴穿过阀座14的端部与气动执行机构6连接，气动执行机构6可设置成两种位置模式，一种位置模式时控制阀板13为初始水平位置，另一种位置模式时阀板13翻转180度。为了保证阀板与阀座之间的密封性，减少罐体4内上、下两部分内物料之间的相互干扰，并且增强过滤效果，在阀板13与阀座14之间设有密封圈11，具体地，阀座14内设有凹槽，密封圈11装设在凹槽内。为了提高罐体4的稳定性，本实施例还在罐体4的底部装设有裙座9，裙座主要用于为罐体4提供支撑，保证罐体4的稳定性。罐体4内部靠下的位置还设有气体分布盘8，气体分布盘8通过气管与进气口7连接，气体分布盘8上均匀分布有多个出气孔，用于将从进气口7进入的气体均匀分散。在具体工作时：发酵培养基由补料口1进入罐体，落到过滤阀门组件5上，发酵培养基由阀板13上的过滤孔12流下，在罐体内气体压力的作用下可由出料口10排出，菌体留在阀板13上完成富集，启动气动机构6翻转阀体180°，菌体面朝下，可再由补料口加入培养液，菌体随着培养液冲下，落入罐体内，可进行下一步的高密度培养或者富集培养工作。同时，培养液冲下时还能够对阀板13上的过滤孔12进行冲洗，以保证下一次对发酵培养基的过滤效果。5补加富硒助剂在接种种子液后的第24h即在添加硒盐的同时，往富集的菌体中一次性按0.1gL的量加入SDS，继续发酵。6结果发酵完毕后过滤出菌体，干燥后得到干菌体中，既可作为富硒富类β-胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌，也可以作为类胡萝卜素发酵制品。7检测7.1β-胡萝卜素检测：参考国标GB8821-2011。7.2硒元素含量的检测方法1硒标准溶液准确称取2.19g干燥的亚硒酸钠优级纯，溶于蒸馏水中，添加80mL48％的HBr，用蒸馏水稀释至1L，制备成含硒1gL的标准硒配备液或直接购买1gL的硒标准液。2样品消化精确称取0.1～0.2g干菌体于150mL高脚烧杯中，加少量水湿样，加消化液双氧水∶高氯酸∶硫酸＝3∶3∶1，摇匀，待气泡平息后加盖表面皿，置通风橱内的电炉上消化至终点，若消化不完全可稍冷后补加双氧水，继续加热消化至完全。置冷后用少量水冲洗表面皿及瓶壁，加氢氧化钠调pH值为7.0，摇匀，用甲酸调pH值为2.0～3.0，加入4mL40％盐酸羟胺,然后定容至50mL，同法做空白溶液。3样品总硒测定取消化液10mL于125mL分液漏斗中，另取7个分液漏斗，分别加入与消化液等量的空白溶液及标准硒工作液0.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL，加水适量，各加入5％EDTA-2Na溶液4mL，0.5％的3，3-二氨基联苯胺溶液2mL，摇匀，置暗处反应30min，用氨水溶液调pH值6.5～7.0，加入甲苯4mL，猛烈振摇萃取3min，静置分层，取甲苯层滤液于1cm比色皿中，在波长425nm处测定吸光度。用标准硒工作液的吸光度绘制标准曲线，从标准曲线上查出与消化液的吸光度对应的硒含量。4样品无机硒测定取样品1.0g左右干菌体于50mL蒸馏水中，置于超声波震荡仪中超声震荡30min,小火微沸30min,过滤，定容50mL,吸取10mL上清液，精确加入甲苯4mL，猛烈振摇萃取3min，静置分层，取甲苯层滤液于lcm比色皿中，在波长425nm处测定吸光度。用标准硒工作液的吸光度绘制标准曲线，从标准曲线上查出对应的无机硒含量。5样品有机硒含量测定有机硒含量用测定的总硒含量减去样品中无机硒的含量即可得到。8检测结果将检测，得到类胡萝卜素发酵制品中，β胡萝卜素的含量为0.081gg，硒元素含量为18.89mgg。实施例2-17实施例2-17的制备方法与实施例1基本相同，各实施例的主要不同之处见表1，其中实施例12和13采用的富集方法为将菌体过滤后收集菌泥再做下一步添加硒盐和继续培养发酵；各实施例的检侧结果见表2。其中，番茄红素的检测方法同GBT22249-2008。表1注：未进行富集操作的实施例如实施例2-8等所用的发酵罐为普通的中试发酵罐。当然，使用实施例1所描述的富集发酵罐进行发酵但不富集也是可行的，实施例1描述的发酵罐最适用于有菌丝的霉菌。“-”代表未添加相应成分。对比例1对比例1采用三孢布拉氏霉菌BlakesleatrisporaBT7251+保藏编号为CCTCCM2014378，三孢布拉氏霉菌BlakesleatrisporaBT7603-保藏编号为CCTCCM2014379采用实施例1的方法进行发酵，不同之处在于，发酵过程不添加硒，即为三孢布拉氏霉常规发酵β胡萝卜素。各实施例和对比例的检侧结果见表2。表2表中：“-”代表未检测。上述实施例的结果说明，发酵过程中添加硒能够一定程度上提高三孢布拉霉产类胡萝卜素的含量。在添加硒盐的操作中，硒盐加入的过早会影响霉菌的生物量，如实施例7，导致类胡萝卜素产量和富硒的量受到影响；较晚的加入硒盐由于发酵已接近结束状态，硒盐的利用不完全，富硒的量受到影响，并且对于类胡萝卜素含量的影响较小；三孢布拉霉虽然对于硒盐的耐受性较高，普通发酵在15mgL的添加浓度下生物量仍有59.7gL，但继续提升硒盐的浓度到20mgL以上，硒盐流加条件下实施例12生物量急剧下降，并且β胡萝卜素的含量也有所下降，当达到50mgL以上即使在富集的条件下如实施例17，生物量开始受到较大影响。采用富集工艺与直接的添加方式相比，能够耐受较高浓度的硒盐条件，生物量受到的影响较小，并且三孢布拉霉自身富硒能力也有所提升；加入富硒助剂之后促进菌体甲硫氨酸等代谢，菌体生物量、β-胡萝卜素和有机硒含量都得到了一定的提升，十二烷基磺酸钠的效果与环己基氨基磺酸钠效果相当。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

权利要求：1.一种富硒富类胡萝卜素三孢布拉氏霉菌的发酵方法，其特征在于，其包括：发酵步骤：往接种有三孢布拉氏霉菌的发酵培养基中添加硒盐；在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉菌包括三孢布拉氏霉正菌和三孢布拉氏霉负菌。2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，在发酵的第0-60h添加所述硒盐。3.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述硒盐的添加量为2-100mgL；优选的，所述硒盐的添加量为5-30mgL。4.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，所述硒盐的添加方式是一次性加入、分批加入或流加；优选的，在发酵第18-36h，添加所述硒盐。5.根据权利要求2所述的发酵方法，其特征在于，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入所述硒盐；优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体。6.根据权利要求1-5任一项所述的发酵方法，其特征在于，在发酵0-60h内往所述发酵培养基中添加富硒助剂，优选的，富硒助剂为十二烷基磺酸钠或环己氨基磺酸钠；优选的，富硒助剂的添加量0.01-1gL；优选的，富硒助剂添加量为0.1-0.5gL；优选的，富硒助剂的添加方式为一次性加入、分批加入或流加；优选的，在发酵第18-36h添加富硒助剂。7.根据权利要求6所述的发酵方法，其特征在于，从所述发酵培养基中富集三孢布拉氏霉菌体，向富集的所述三孢布拉氏霉菌体中加入富硒助剂；优选的，在发酵第18-36h富集三孢布拉氏霉菌体。8.根据权利要求1-5任一项所述的发酵方法，其特征在于，在所述发酵培养基中，所述三孢布拉氏霉正菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014378；所述三孢布拉氏霉负菌的保藏编号为CCTCCNO:M2014379。9.一种富硒富类胡萝卜素的三孢布拉氏霉菌，其特征在于，其由权利要求1-8任一项所述的发酵方法发酵制得。10.一种类胡萝卜素发酵制品，其特征在于，该发酵制品含类胡萝卜素和硒元素；优选的，每克该发酵制品中硒含量不少于0.016mg；优选的，每克该发酵制品中类胡萝卜素含量不少于0.063g，其中类胡萝卜素优选为β-胡萝卜素和或番茄红素。

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