申请/专利权人:嘉应学院
申请日:2020-12-29
公开(公告)日:2022-04-08
公开(公告)号:CN112741001B
主分类号:A01H4/00(20060101)
分类号:A01H4/00(20060101)
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2022.04.08#授权;2021.05.21#实质审查的生效;2021.05.04#公开
摘要:本发明公开一种黄荆愈伤组织诱导方法,包括:步骤1:外植体的准备,从健壮植株上切取带有腋芽的幼嫩枝条作为离体培养材料,整个植株的13以上部分,将切取的嫩枝去除叶片,切成4~6cm长且带有2~3个腋芽的节段;步骤2:材料预处理,将步骤1获得的茎段用流水冲去表面脏物,用浓度为5%洗衣粉溶液浸泡10min,用软毛刷轻轻刷洗外植体表面,除去附着在外植体表面的尘土和菌体;步骤3:消毒灭菌,流水冲洗茎段30min,沥干水后,放置到超净工作台上消毒灭菌,处理后用无菌水冲洗6~10次,切除茎段的伤口部位,在无菌滤纸上截取带有腋芽长4~5mm的小段;步骤4:愈伤组织诱导培养,将经消毒处理后的黄荆幼茎段接种到诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养。
主权项:1.一种黄荆愈伤组织诱导方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1:外植体的准备从健壮植株上切取带有腋芽的幼嫩枝条作为离体培养材料,将切取的嫩枝去除叶片,切成4~6cm长且带有2~3个腋芽的节段;步骤2:材料预处理将步骤1获得的茎段用流水冲去表面脏物,用浓度为5%洗衣粉溶液浸泡10min,用软毛刷轻轻刷洗外植体表面,除去附着在外植体表面的尘土和菌体;步骤3:消毒灭菌流水冲洗茎段30min,沥干水后,放置到超净工作台上消毒灭菌,处理后用无菌水冲洗6~10次,切除茎段的伤口部位,在无菌滤纸上截取带有腋芽长4~5mm的小段;步骤4:愈伤组织诱导培养将经消毒处理后的黄荆幼茎段接种到诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养3天以上;在上述步骤4中,诱导培养基的组成是:以MS培养基为基本培养基,添加TDZ和KT,琼脂0.9%,蔗糖3%,其中,TDZ的浓度为1.50μM,KT的浓度为0.50μM;pH值在灭菌前为5.8~6.0,100~130℃高压灭菌。
全文数据:
权利要求:
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