申请/专利权人：上海市农业科学院

申请日：2021-03-11

公开（公告）日：2022-09-20

公开（公告）号：CN115074461A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.08.25#授权;2022.10.11#实质审查的生效;2022.09.20#公开

摘要：一种犬流感病毒、犬冠状病毒和犬呼肠孤病毒的三重PCR检测方法，包括：1查找犬流感病毒CIV、犬冠状病毒CCOV和犬呼肠孤病毒CRV的保守区序列；2根据GenBank上公布的CIV病毒的M基因、CCOV病毒的L1基因和CRV病毒的M基因序列信息，分别设计上下游引物对；3进行三重PCR反应，反应体系中，引物为2.5‑5μmolL，模板量为1‑5ngμL，其中，3组引物的添加量符合扩增CIV病毒的引物：扩增CCOV病毒的引物：扩增CRV病毒的引物＝1：0.5‑1：1。利用本发明，可对单一样品同时进行三种不同病原的检测，具有灵敏性高、特异性强、省时省力等优点，以方便快速、准确地进行相关流行病学监测。

主权项：1.一种犬流感病毒、犬冠状病毒和犬呼肠孤病毒的三重PCR检测方法，包括以下步骤：1查找犬流感病毒CIV、犬冠状病毒CCOV和犬呼肠孤病毒CRV的保守区序列；2根据GenBank上公布的CIV病毒的M基因、CCOV病毒的L1基因和CRV病毒的M基因序列信息，分别设计上下游引物对；扩增CIV病毒的引物对序列如下：CIV-F5’-CTTCTAACCGAGGTCGAAACG-3’；CIV-R5’-AGGGCATTTTGGACAAAGCGTCTA-3’；扩增CCOV病毒的引物对序列如下：CCOV-F5’-GTGCTTCCTCTTGAAGGTACA-3’；CCOV-R5’-AGGGTAATGGGGTTGAAGAATGA-3’；扩增CRV病毒的引物对序列如下：CRV-F5’-ATCGGGAATGCAGAATATGATCC-3’；CRV-R5’-GTTTCACTGTTCACCTTACCAGCA-3’；3进行三重PCR反应以待测样品为模板，以上述三组引物对序列为引物，进行三重PCR反应，扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检测；反应体系中，引物为2.5-5μmolL，模板量为1-5ngμL，其中，三组引物的添加量符合扩增CIV病毒的引物：扩增CCOV病毒的引物：扩增CRV病毒的引物＝1：0.5-1：1。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海市农业科学院 犬流感病毒、犬冠状病毒和犬呼肠孤病毒的三重PCR检测方法

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