申请/专利权人：河北化工医药职业技术学院

申请日：2021-05-21

公开（公告）日：2022-09-20

公开（公告）号：CN113358772B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/86

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.09.20#授权;2021.09.24#实质审查的生效;2021.09.07#公开

摘要：本发明提供基于不同分离机制HPLC指纹图谱串联法的建立与应用，涉及药品分离分析领域。该基于不同分离机制HPLC指纹图谱串联法的建立，包括如下具体步骤：首先实现HILIC‑ISC串联HPLC指纹图谱的拟合、串联指纹图谱保留时间的计算和串联指纹图谱峰面积的计算。通过将串联谱与单一分离机制所得指纹图谱的评价结果相比较，串联指纹图谱与单一分离机制指纹图谱对27批苦参总碱样品和市售样品定性定量评价的结论基本一致，说明串联评价结果准确可靠，能整合不同分离机制下所得图谱的质量评价结果，具有实际意义。

主权项：1.基于不同分离机制的苦参总碱HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下具体步骤：首先实现HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱的拟合、串联指纹图谱保留时间的计算和串联指纹图谱峰面积的计算，再通过苦参总碱样品、市售样品的指纹图谱以及对照指纹图谱的信号分别导入评价系统软件，将检测波长为210nm的HILIC-HPLC指纹图谱和检测波长为220nm的ISC-HPLC指纹图谱按HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱的拟合原理用软件进行串联处理，即得到苦参总碱HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱；HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱的拟合原理为：以矩阵 表示HILIC-HPLC分离机制下所得到的指纹图谱的特征数据，该矩阵由p×n个数排成，共有n个列向量，有p个行向量，其中p＝29，n＝18，i＝1,2,…,p；j1＝1,2,…,n；以矩阵 表示ISC-HPLC分离机制下所得到的指纹图谱的特征数据，该矩阵由p×q个数排成，共有q个列向量，有p个行向量，其中p＝29，q＝17，i＝1,2,…,p；j2＝1,2,…,q；所得苦参总碱HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱的特征数据可用矩阵 表示，该矩阵由p×u个数排成，共有u个列向量，有p个行向量，其中p＝29，u＝n+q＝18+17＝35，i＝1,2,…,p；j3＝1,2,…,u；串联指纹图谱保留时间的计算原理为：令矩阵Tp×u表示苦参总碱HILIC-ISC串联HPLC指纹图谱中各指纹峰的保留时间为： 其中HILIC区域为前n个列向量，即为矩阵Xp×n中n个列向量所代表的保留时间，ISC区域为后q个列向量，实际是矩阵Wp×q所代表的列向量在时间维度上统一向后平移完成HILIC-HPLC分离所需要的时间，即矩阵Wp×q所代表的保留时间特征数据都加上32min，在串联HPLC指纹图谱中，前32min内HILIC-HPLC指纹图谱各指纹峰的峰号不变，仍然为1-18号峰，其中13号为MT，16号为SPR，17号峰为OMT；32-74min内原ISC-HPLC指纹图谱中指纹峰的峰号发生变化，即在原峰号的基础上均加18，也就是ISC-HPLC指纹图谱中的1号峰在串联HPLC指纹图谱中变为19号峰，2号峰变为20号峰，依次类推，原6号峰即OMT峰变为24号峰，原14号峰即SPR峰变为32号峰，原16号峰即MT峰变为34号峰。

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