申请/专利权人：南京兔牙生物科技有限公司

申请日：2021-09-26

公开（公告）日：2022-10-25

公开（公告）号：CN113817805B

主分类号：C12Q1/6806

分类号：C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12Q1/6886;C12N15/11;C40B50/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2022.10.25#授权;2022.01.07#实质审查的生效;2021.12.21#公开

摘要：本发明涉及一种MGMT启动子甲基化检测方法、引物组以及试剂盒，属于基因检测技术领域。本专利的方法可以有效地对MGMT启动子上的99个CpG位点的甲基化水平进行检测，具有检测准确性高、覆盖范围广的优点。

主权项：1.一种MGMT启动子区甲基化检测文库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，获取样本并提取DNA，对DNA通过甲基化修饰转化试剂亚硫酸氢盐进行处理；样本是FFPE组织样本，提取DNA是通过磁珠法获取得到；步骤2，通过用于扩增MGMT启动子上CpG位点的引物组对步骤1中得到的核苷酸进行多重PCR扩增，获得扩增产物；步骤3，对扩增产物进行末端修补、末端加碱基A、加接头后进行扩增，再经过纯化后，得到文库；所述的引物组包括上游引物和下游引物，上游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.1-4所示，下游引物的核苷酸序列如SEQIDNO.5-8所示；所述的引物组能够扩增MGMT启动子99个CpG位点；所述的步骤2中，多重PCR扩增过程执行以下扩增程序：92-97℃预变性5-15min；92-97℃变性20-40s，40-65℃退火20-40s，70-75℃延伸0.5-5min，共计30-48个循环；70-75℃终延伸3-8min。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南京兔牙生物科技有限公司 一种MGMT启动子甲基化检测方法、引物组以及试剂盒

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