申请/专利权人:河南省尤里卡生物科技有限公司
申请日:2022-09-20
公开(公告)日:2022-11-25
公开(公告)号:CN115386564A
主分类号:C12N9/72
分类号:C12N9/72
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2022.12.13#实质审查的生效;2022.11.25#公开
摘要:本发明公开了一种尿激酶的纯化方法,属于生物工程及化学工程领域。所述纯化方法包括以下步骤:取尿激酶粗品,加入乙醇、乙酸铵、磷酸钾溶液、乙酸钙溶液搅拌,得到尿激酶料液;在尿激酶料液中加入正丁酸铵溶液,离心过滤,得尿激酶上清液;将尿激酶上清液上吸附柱,用洗脱液Ⅰ洗脱吸附柱,收集洗脱液;洗脱液上吸附柱,用洗脱液Ⅱ洗脱吸附柱,收集洗脱液;洗脱液上亲和层析柱,用洗脱液Ⅲ洗脱亲和层析柱,收集洗脱液;洗脱液经超滤膜,加入磷酸钾溶液超滤,得超滤液;超滤液加入乙醇醇沉,离心,留取沉淀物、淀物经冷冻干燥得尿激酶。本发明提供的纯化方法原料来源广泛,制备方法简单、生产成本低、可实现工业化大规模生产。
主权项:1.一种尿激酶的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:1取尿激酶粗品,加入乙醇、乙酸铵、磷酸钾溶液、乙酸钙溶液搅拌,得到尿激酶料液;2在步骤1中得到的尿激酶料液中加入正丁酸铵溶液,搅拌后,离心过滤,弃去沉淀,得尿激酶上清液;3先用洗脱液Ⅰ平衡吸附柱,再将步骤2中得到的尿激酶上清液上吸附柱,再次用洗脱液Ⅰ洗脱吸附柱,收集洗脱液;4先用洗脱液Ⅱ平衡吸附柱,再将步骤3中得到的洗脱液上吸附柱,再次用洗脱液Ⅱ洗脱吸附柱,收集洗脱液;5先用洗脱液Ⅲ平衡亲和层析柱,再将步骤4中得到的洗脱液上亲和层析柱,再次用洗脱液Ⅲ洗脱亲和层析柱,收集洗脱液;6将步骤5中得到的洗脱液经超滤膜,加入磷酸钾溶液超滤,得超滤液;7将步骤6中得到超滤液加入乙醇醇沉,离心,留取沉淀物;8将步骤7中得到的沉淀物经冷冻干燥得尿激酶。
全文数据:
权利要求:
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