申请/专利权人：上海交通大学医学院附属第九人民医院

申请日：2021-03-03

公开（公告）日：2023-04-07

公开（公告）号：CN112779214B

主分类号：C12N5/0775

分类号：C12N5/0775

优先权：["20200306 CN 2020101526382"]

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.04.07#授权;2021.05.28#实质审查的生效;2021.05.11#公开

摘要：本发明提出了一种临床级SVF的制备方法，包括：1用生理盐水漂洗人体脂肪，去除手术中脂肪的其他药物成分，静置或离心得到漂洗后的人体脂肪；2将上述漂洗后的人体脂肪置于容器中，在所述容器中加入胶原酶溶液及生理盐水；3将所述容器置于摇床中，37℃温度下消化20‑45分钟，所述摇床的振荡频率为每分钟175‑400rpm；4将步骤3摇床培养后的容器离心5‑15分钟，离心力为1500‑2000rpm，在无菌环境下去除上层黄色油脂层，收集底层物质；5将所述滤渣用所述洗涤液离心洗涤。本发明方法制得的SVF，其细胞总数、细胞活性较好。

主权项：1.一种临床级SVF的制备方法，其特征在于，包括：（1）用生理盐水漂洗人体脂肪，去除手术中脂肪的其他药物成分，静置或离心得到漂洗后的人体脂肪；（2）将上述漂洗后的人体脂肪置于容器中，在所述容器中加入胶原酶溶液及生理盐水；所述胶原酶溶液为：600单位注射用胶原酶中加入1-3ml生理盐水，充分混合，即得；其中所述注射用胶原酶为用于治疗椎间盘突出髓核的制剂；按照每1ml脂肪，加入所述胶原酶溶液0.05-0.15ml，随后加入生理盐水至总体积为脂肪体积的2倍；（3）将所述容器置于摇床中，37℃温度下消化20-45分钟，所述摇床的振荡频率为每分钟175-400rpm；（4）将步骤（3）摇床培养后的容器离心5-15分钟，离心力为1500-2000g，在无菌环境下去除上层黄色油脂层，收集底层物质；在所述底层物质中加入洗涤液反复吹打重悬，过滤，去除滤液，滤渣备用；所述洗涤液由丙氨酰谷氨酰胺、葡萄糖和生理盐水组成，具体为每100ml生理盐水中加入800ul丙氨酰谷氨酰胺和10ml10%葡萄糖；（5）将所述滤渣用所述洗涤液离心洗涤，离心力为1200-1500g，每次3-5分钟，下层细胞团即为SVF。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海交通大学医学院附属第九人民医院 一种临床级SVF的制备方法

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