申请/专利权人：山西大学

申请日：2021-10-14

公开（公告）日：2023-09-22

公开（公告）号：CN113981008B

主分类号：C12N15/89

分类号：C12N15/89;C12N9/22;A01K67/033

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.09.22#授权;2022.02.18#实质审查的生效;2022.01.28#公开

摘要：本发明属于飞蝗生物技术和基因编辑技术领域，具体涉及一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用，一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法，其包括以下步骤：1构建Lmzen基因敲除RNP复合物，其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件：T7启动子，Lmzen基因靶点和tracRNA‑crRNA所转录而成的RNAsgRNA；Cas9蛋白；ddH2O；2将步骤1所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵，孵化，得G0代，将G0代与野生型杂交得G1代；3将步骤2所述G1代自交，获得的G2代，即为飞蝗Lmzen纯合突变体。本发明利用CRISPRCas9技术敲除飞蝗zen基因，提供了稳定有效的Lmzen纯合突变体品系。首次敲除飞蝗zen基因，成功实现了纯合突变体的构建，其后代具有大量死亡表型。

主权项：1.一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法，其特征在于，包括以下步骤：1）构建Lmzen基因敲除RNP复合物，其包括从5’端到3’端的以下可操作性连接的元件：T7启动子，Lmzen基因靶点和tracRNA-crRNA所转录而成的RNA；Cas9蛋白；ddH2O；所述Lmzen基因是指飞蝗zerknüllt基因；所述LmZen基因靶点的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示；2）将步骤1）所述的Lmzen基因敲除RNP复合物共转新鲜飞蝗卵，孵化，得G0代，将G0代与野生型杂交得G1代；3）将步骤2）所述G1代自交，获得的G2代，即为飞蝗Lmzen纯合突变体。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山西大学 一种制备飞蝗Lmzen纯合突变体的方法、RNP复合物及应用

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