申请/专利权人：渤海大学

申请日：2020-11-12

公开（公告）日：2023-10-24

公开（公告）号：CN112557347B

主分类号：G01N21/47

分类号：G01N21/47;G01N21/59

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.10.24#授权;2021.04.13#实质审查的生效;2021.03.26#公开

摘要：本发明公开了一种黏液层中乳糜粒子迁移模型的制备及检测方法，涉及粒子迁移模型的制备及检测技术领域，包括以下步骤：S1、获取动物肠黏液；S2、制备人工乳糜，在一定条件下保存；S3、将肠黏液加入样品瓶中，然后再加入人工乳糜。该黏液层中乳糜粒子迁移模型的制备及检测方法，解决了常规动物实验周期长、操作难度大、涉及伦理道德等问题。

主权项：1.一种黏液层中乳糜粒子迁移模型的制备方法，包括以下步骤：S1、获取动物肠黏液；S2、制备人工乳糜，在一定条件下保存；S3、将肠黏液加入样品瓶中，然后再加入人工乳糜；步骤S1中，所述肠黏液来自猪的大肠，猪的大肠一定要新鲜，选用屠宰后立即取猪大肠提取肠黏液，运输过程中可以放在冰块上保存，提取肠黏液前用PBS缓冲液轻轻洗净猪大肠表面的污物，但不要用力揉搓，清洗完成后将猪大肠剪成15~20cm的小段，用力揉搓大肠表面收集黏液，向肠黏液中加入蛋白酶抑制剂，在-20℃的条件下保存；步骤S2中，首先将待检测的物质按所需浓度充分溶解，与模拟唾液按体积比1:1的比例混合，加入唾液淀粉酶，使唾液淀粉酶的酶活力值为70~100UmL，调节pH为7，在25℃静置2~5min；然后将上述混合溶液与模拟胃液按体积比1:1的比例混合，加入胃蛋白酶，使胃蛋白酶的活力值为1800~2200UmL，用1M的盐酸调pH为3，将溶液放在振荡培养箱中2h，温度为37℃，振荡频率设定为80-150rmin；最后将上述混合溶液与模拟肠液按体积比1:1的比例混合，加入胰酶，使胰酶的活力值为80~120UmL，用1M的氢氧化钠调pH为7，将溶液放在振荡培养箱中2h，温度为37℃，振荡频率设定为80-150rmin制备成人工乳糜，所述人工乳糜在台式恒温振荡器中保存，温度设定为37℃，振荡频率设定为80-150rmin；步骤S3中，所述样品瓶中肠黏液的厚度在0.5~1.5cm之间，人工乳糜的厚度在3~6cm之间，将肠黏液和人工乳糜按顺序添加；首先将肠黏液加入到样品瓶中，然后加入人工乳糜，缓慢添加避免产生气泡，添加时溶液不要溅到瓶壁上，保证液面与样品支架平齐；在对样品瓶中的样品进行检测时，黏液层中乳糜粒子迁移模型的检测方法，包括以下步骤：S1、首先开启电脑和多重光散射仪，等待仪器自检完成，稳定30min仪器准备完毕后可以开始运行测试；S2、然后打开电脑软件等待仪器初始化完成，之后将多重光散射仪的检测温度调整为37℃，等待仪器上升到指定温度，按下open按钮打开多重光散射仪的盖子，将制好的样品瓶放入多重光散射仪中，按下close按钮关闭仪器盖子，需要注意的是避免用手推，放样品过程中不要剧烈摇动样品瓶；S3、最后在电脑上新建扫描程序，多重光散射仪的稳定时间设置为2~10min，检测频率设定为2~5min扫描一次，测定时间设定为8~12h，点击start按钮开始测试，通过仪器生成的指纹图谱分析乳糜粒子的迁移。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 渤海大学 一种黏液层中乳糜粒子迁移模型的制备及检测方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD