申请/专利权人：济南大学

申请日：2021-10-12

公开（公告）日：2023-11-07

公开（公告）号：CN113758914B

主分类号：G01N21/76

分类号：G01N21/76;G01N27/416;G01N27/30;G01N27/327;G01N33/53

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2023.11.07#授权;2021.12.24#实质审查的生效;2021.12.07#公开

摘要：本发明涉及一种基于尖晶石单相二元金属氧化物NiCo2O4作为高效共反应加速器无标型免疫传感器的制备及其应用，本发明属于生物传感技术领域与新型功能材料的新颖性结合。具体是Au修饰的NiCo2O4与阳极低激发电位氮掺杂酰肼共轭碳点结合作为电致化学发光传感平台，以此构建无标型电致化学发光免疫传感器，用于神经元特异性烯醇化酶的超灵敏检测。NiCo2O4具有丰富的氧化还原化学性质、具有大的比表面积、高电导率、低成本和环境友好等诸多诱人的优点，在许多电极反应中显示出优异的催化活性。这种催化活性归因于Ni3+Ni2+和Co3+Co2+提供了丰富的氧化还原反应，使NiCo2O4比相应的单独金属氧化物NiO和Co3O4具有更好的生物传感效率。通过Au修饰的NiCo2O4不仅能提高材料的电导率和加速电子转移，而且还可以增加抗原抗体的结合数量，增强ECL信号，实现对生物分子的灵敏准确检测。

主权项：1.一种基于金修饰的NiCo2O4作为高效共反应加速器构建的无标型ECL传感器，其特征在于包括以下步骤：1用抛光粉将玻碳电极打磨，再使用去离子水清洗，将电极置于5mmolL铁氰化钾溶液中，并在-0.2~0.6V电位下进行扫描，使峰电位的差值小于110mV；2将8μL，1~3mgmL钴酸镍@金@氮掺杂碳量子点纳米复合物溶液滴加在电极上，4℃下干燥；3将8μL，1~2μgmL神经元特异性烯醇化酶NSE抗体滴加在电极上，在4℃冰箱下干燥之后，用PBS清洗，以除去多余抗体，4℃下干燥；4将3μL，质量分数为1~2%BSA溶液滴加于电极上，用以封闭非特异性结合位点，干燥之后使用PBS洗去多余BSA，4℃下干燥；5将8μL，0.0001~100ngmL一系列不同浓度的NSE抗原标准溶液滴加于电极上，4℃下干燥之后，用PBS清洗，除去多余抗原，4℃下干燥；所述的NiCo2O4@Au材料的制备步骤如下：1NiCo2O4的制备取0.75-3mmol的CoCl2•4H2O、0.375-1.5mmol的NiCl2•6H2O和22.5-90mmol尿素溶于20mL去离子水中室温下连续搅拌30min后转移到50mL的高压反应釜中，120℃反应6h后自然冷却至室温，最后离心、洗涤、干燥；2NiCo2O4@Au的制备将25-100mg制备的NiCo2O4和1.5-6mL2%的HAuCl4分散加入10-40mL去离子水，搅拌5min后加入3.5-14mg聚乙烯吡咯烷酮PVP放入溶液中再进行5min的搅拌，以此来防止金纳米粒子的团聚；然后，将2.5-10mL5molL柠檬酸钠溶液和1滴硼氢化钠溶液并继续搅拌12h，生成物用去离子水和乙醇冲洗沉淀，直到上清液无色，并在50℃下干燥一夜；所述的NiCo2O4@Au@NHCDs-Ab1材料的制备步骤如下：1NHCDs的制备在连续搅拌下将1.05-4.2g柠檬酸溶于5-20mLDMF中，随后滴加0.5-2mL水合肼后转移到高压反应釜进行溶剂热反应，180℃下进行12h热处理后自然冷却到室温；得到的溶液在12000rpm下离心10min去除大颗粒残留物，用离子水对溶液进行透析，然后60℃真空干燥，最后将获得的黑色粉末储存在4℃密闭容器中；2NiCo2O4@Au@NHCDs的制备将3-12mgNiCo2O4@Au与1-4mgNHCDs溶解在去离子水中，用震荡机震荡24h后进行离心、洗涤、干燥，得到目标产物；3NiCo2O4@Au@NHCDs-Ab1的制备称取6mgNiCo2O4@Au@NHCDs复合物，加入1mL10μgmL神经元特异性烯醇化酶抗体，1mLPBSpH=7.38，在-4℃恒温振荡12h后离心处理，向得到的沉淀物中加入1mLPBS溶液得到NiCo2O4@Au@NHCDs-Ab1。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 济南大学 一种基于金修饰的钴酸镍作为高效共反应加速器构建的无标型ECL传感器的制备及应用

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