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【发明公布】一种能同时对大肠埃希氏菌进行鉴定和鞭毛分型的方法和应用_张丽杰_202310978968.0 

申请/专利权人:张丽杰

申请日:2023-08-04

公开(公告)日:2023-11-14

公开(公告)号:CN117054546A

主分类号:G01N30/02

分类号:G01N30/02;G01N30/72;G01N30/06;G01N33/68

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2023.12.01#实质审查的生效;2023.11.14#公开

摘要:本发明属于细菌分型技术领域,具体涉及一种能同时对大肠埃希氏菌进行鉴定和鞭毛分型的方法和应用。该方法首先将待测菌株的单克隆菌落在水中分散,以含有胰酶的碳酸氢铵溶液消化后,用浸润过甲酸的过滤器进行过滤,向滤液中加入甲酸后,即可进行检测。该方法不存在传统血清学分型方法的各种弊端,且无需进行大量富集鞭毛以及在膜上酶解消化等操作,大幅缩短了检测时间。检测结果不仅能够用于在种的水平鉴定待测菌株,还能准确鉴定其鞭毛分型。

主权项:1.一种能同时对大肠埃希氏菌进行鉴定和鞭毛分型的方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤A、将待测菌株在培养基上培养,从培养物中挑取单克隆菌落,置于双蒸水中并充分分散,加入胰酶溶液,在35~39℃消化至少1h;所述胰酶溶液中含有80~120μgmL胰酶和80~120mmolL碳酸氢铵,所述胰酶溶液与所述双蒸水的体积比为0.8~1.2:1;步骤B、将步骤A所得消化液置于已被0.08~0.12%vv甲酸水溶液润湿处理过的过滤器上,以10000~15000×g离心5~10min,收集滤液;步骤C、向步骤B所得滤液中加入2~2.5倍量0.08~0.12%vv甲酸水溶液,混匀后进行检测,根据检测结果判断待测菌株的类型和鞭毛分型。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 张丽杰 一种能同时对大肠埃希氏菌进行鉴定和鞭毛分型的方法和应用

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