申请/专利权人：山东省农业科学院作物研究所

申请日：2023-05-31

公开（公告）日：2023-12-19

公开（公告）号：CN117247970A

主分类号：C12N15/84

分类号：C12N15/84;C12N15/113;C12N15/29

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.05#实质审查的生效;2023.12.19#公开

摘要：本发明提供一种利用基因编辑激活小麦Glu‑1Ax‑null亚基表达的方法，所述方法包括：设计靶向Glu‑1Ax‑null基因中的提前终止密码子的特异sgRNA；将所述特异sgRNA克隆至pEtRNA载体BsaI位点间，构建小麦Glu‑1Ax‑null基因CRISPRSpCas9编辑载体；利用农杆菌将所述小麦Glu‑1Ax‑null基因CRISPRSpCas9编辑载体导入小麦细胞，获得提前终止密码子破坏的基因编辑纯合株系。本发明的特异sgRNA针对Glu‑1Ax‑null基因第1216‑1218位提前终止密码子附近设计，通过农杆菌将CRISPRSpCas9基因编辑载体转入小麦，能够特异性破坏提前终止密码子，激活小麦沉默的高分子量麦谷蛋白Glu‑1Ax‑null亚基的表达。

主权项：1.一种利用基因编辑激活小麦Glu-1Ax-null亚基表达的方法，包括以下步骤：设计靶向Glu-1Ax-null基因中的提前终止密码子的特异sgRNA；将所述特异sgRNA克隆至pEtRNA载体BsaI位点间，构建小麦Glu-1Ax-null基因CRISPRSpCas9编辑载体；和利用农杆菌将所述小麦Glu-1Ax-null基因CRISPRSpCas9编辑载体导入小麦细胞，获得提前终止密码子破坏的基因编辑纯合株系，其中：所述pEtRNA载体的序列如SEQIDNO.3所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 山东省农业科学院作物研究所 激活小麦沉默的Glu-1Ax亚基表达的方法及其相关生物材料

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