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【发明公布】一种提高植物莨菪毛状发根中莨菪生物碱含量的方法_上海应用技术大学_202311357098.1 

申请/专利权人:上海应用技术大学

申请日:2023-10-19

公开(公告)日:2023-12-22

公开(公告)号:CN117265000A

主分类号:C12N15/82

分类号:C12N15/82;C12N15/31;A01H5/06;A01H6/82

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.01.09#实质审查的生效;2023.12.22#公开

摘要:本发明公开了一种提高植物莨菪毛状发根中莨菪生物碱含量的方法,其包括如下步骤:构建载体、获得莨菪无菌组培苗、诱导毛状根、获得浸染后发根、扩大培养。本发明解决了莨菪毛状根大规模培养过程中氧传输是制约毛状根生长和生物碱合成的瓶颈问题。本发明能够大幅提高莨菪发根中有用生物碱的含量,尤其是药用价值和市场价值更大的东莨菪碱的含量。本发明同时还具有操作方法简单,能够产出生物碱含量高的莨菪毛状发根,节约了大量的自然资源,保护了自然环境,且能够满足巨大的市场需求,提供了一条新的途径,具有很好的应用前景。

主权项:1.一种提高植物莨菪毛状发根中莨菪生物碱含量的方法,其特征在于:包括,构建载体:从酵母和目视植物拟南芥中获得定位序列;构建带有绿色荧光蛋白GFP基因的植物表达载体,在分别转化烟草原生质体、酶切纯化后扩增连接在载体上,转化大肠杆菌;双酶切处理后将定位基因连入含有目的基因的载体上;获得莨菪无菌组培苗:将莨菪种子洗涤灭菌,洗净后使用次氯酸钠处理,再次洗净,在MS基础培养基上进行孵育进行发芽,在核实的温度光强下继续培养,制得2个月龄的幼苗;诱导毛状根:将得到的载体转入发根农杆菌,以农杆菌为介导的叶盘法转化莨菪,诱导产生毛状根;获得浸染后发根:阳性菌落接种于培养基上,振荡培养后离心取得菌体,悬浮培养后稀释,将叶片处理后放入菌液中浸泡,进行浸染,然后叶片置入固体培养基上,暗室培养,然后准入选择培养基上光照培养,待叶盘边缘发根后切下,继续培养,进行继代,获得提高生物碱含量的毛状发根;扩大培养:将获得发根接种到培养基上进行培养获得大量根系。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海应用技术大学 一种提高植物莨菪毛状发根中莨菪生物碱含量的方法

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