申请/专利权人：景忠山国药(唐山)有限公司

申请日：2023-09-21

公开（公告）日：2023-12-29

公开（公告）号：CN117310020A

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/54;G01N30/86

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.01.16#实质审查的生效;2023.12.29#公开

摘要：本发明涉及生物医学析技术领域，具体公开一种基于非靶向代谢组学检测冠心病大鼠血清中心脑欣潜在生物标志物的方法。本发明通过结扎和未结扎冠状动脉左前降支手术，得CHD大鼠和假手术大鼠；对所有大鼠进行分组饲养，之后进行股动脉取血，并对所得血清样本进行提取；通过特定的色谱质谱条件进行非靶向检测，将内源性成分尽可能多地从血清出分离出来，获得更多的代谢物原始数据；通过软件分析选出假手术组与模型组的差异代谢物，并筛选模型组与心脑欣给药组具有显著差异，且向假手术组有恢复趋势的潜在生物标志物。本发明可为适用于心脑欣治疗的心血管疾病患者的有效性治疗提供技术支撑。

主权项：1.一种基于非靶向代谢组学检测冠心病大鼠血清中心脑欣潜在生物标志物的方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，对健康SD大鼠进行结扎冠状动脉左前降支手术，制备结扎左前降支致心肌缺血大鼠模型，得CHD大鼠；同时，对健康SD大鼠进行未结扎冠状动脉左前降支手术，得假手术大鼠；S2，将所述CHD大鼠和假手术大鼠进行分组饲养；其中，所述CHD大鼠至少分为2组—模型组和心脑欣给药组，所述假手术大鼠作为假手术组；S3，对所述CHD大鼠和假手术大鼠进行股动脉取血，凝固，离心，得血清样本；S4，向所述血清样本中加入甲醇进行提取，将所得血清提取液固液分离，挥干溶剂后，复溶，得待测样本；S5，采用高效液相色谱质谱联用法对所述待测样本进行检测，得代谢物原始数据；其中，所述高效液相色谱的条件包括：采用C8色谱柱，流动相A为含0.09wt％～0.11wt％甲酸和4.5～5.5mM甲酸铵的乙腈水溶液，流动相B为含0.09wt％～0.11wt％甲酸和4.5～5.5mM甲酸铵的乙腈与异丙醇的混合溶液，梯度洗脱；所述质谱采用电喷雾离子源，正负离子模式；其中，正离子的离子源电压为3.6～3.8kV，负离子的离子源电压为3.4～3.6kV，质荷比扫描范围为150～1500mz。S6，对所述代谢物原始数据进行数据处理，鉴定代谢物，得化合物列表；利用PCA和PLS-DA分析，以VIP≥1和P＜0.05的条件选出假手术组与模型组的差异代谢物；以P＜0.05的条件，从所述差异代谢物中筛选模型组与心脑欣给药组具有显著差异，且向假手术组有恢复趋势的代谢物，得心脑欣防治冠心病的潜在生物标志物。

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权利要求：

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