申请/专利权人:成都中医药大学
申请日:2021-09-16
公开(公告)日:2024-01-30
公开(公告)号:CN115812595B
主分类号:A01H4/00
分类号:A01H4/00
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.01.30#授权;2023.04.07#实质审查的生效;2023.03.21#公开
摘要:本发明属于植物生物技术领域,特别涉及一种川贝母人工种子制备方法。通过优化川贝母外植体诱导成愈伤组织、愈伤组织分化过程使用的最佳培养基、以及胚乳胶液成分和人工种皮成分进行的筛选,最终得到一套系统的、生根率稳定的川贝母人工种子制备方法。本发明的技术方案中,所述胚乳胶液的成分为:3%海藻酸钠+3%蔗糖+MS+6‑BA+NAA+多菌灵+活性炭。所述6‑BA的浓度为1.5‑2mgL,所述NAA的浓度为0.4‑0.5mgL,所述多灵菌的浓度为1.0‑1.5gL,所述活性炭的浓度为1.0‑1.5gL。通过该方法,能提升川贝母药源的供应,以满足日益增长的生产和临床需要。本发明建立了一个具有稳定、出苗率高、便捷简单经济实用的川贝母人工种子技术体系,对川贝母种源扩大,资源危机缓解有积极作用。
主权项:1.一种川贝母人工种子制备方法,其特征在于,包括如下步骤:步骤1、将川贝母的无菌苗鳞茎作为外植体接种于第一培养基中,诱导形成愈伤组织;所述第一培养基由MS培养基和1.0mgLPicloram组成,于培养温度为20±2℃,光照强度3000Lx,光照周期为12hd的培养条件下进行培养;步骤2、将所述愈伤组织转移至第二培养基进行分化诱导得到愈伤组织块;所述第二培养基由MS培养基、1.0mgL6-BA和0.2mgLNAA组成,于培养温度为20±2℃,光照强度3000Lx,光照周期为12hd的培养条件下进行培养;步骤3、将步骤2得到的所述愈伤组织块用胚乳胶液与CaCl2溶液进行第一次包埋;所述胚乳胶液由质量浓度为3%的海藻酸钠溶胶、MS培养基、3%蔗糖、1.5-2mgL6-BA、0.4-0.5mgLNAA、1.0-1.5gL多菌灵和1.0-1.5gL活性炭组成;步骤4、将步骤3得到的第一次包埋完成的人工种子再投入外种皮凝胶溶液进行第二次包埋;所述外种皮凝胶由2%的海藻酸钠溶液、1.0-1.5gL多菌灵和菌悬液组成,所述菌悬液为:对川贝母种子灭菌后,除去种皮对胚乳内所含内生菌进行混合培养48h,超高速离心所得菌体沉淀所制凝胶悬浊液。
全文数据:
权利要求:
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