申请/专利权人：浙江迪福润丝生物科技有限公司

申请日：2023-10-20

公开（公告）日：2024-02-20

公开（公告）号：CN117089575B

主分类号：C12N15/85

分类号：C12N15/85;C12N15/64;G01N21/64;C12Q1/37;C12N15/57;C12N15/62

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.20#授权;2023.12.08#实质审查的生效;2023.11.21#公开

摘要：本发明公开了一种质粒及HCV蛋白酶抑制剂筛选及药效评价的方法，在GFP中插入丙型肝炎病毒的NS34A蛋白酶相关裂解位点的序列，形成改造后的GFP报告蛋白，在上述改造后的GFP报告蛋白质粒上，克隆表达丙型肝炎病毒蛋白酶，可用于检测NS34A蛋白酶活性以及蛋白酶相关抑制剂活性，最终形成丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂筛选及药效评价平台。本发明能有效克服上述蛋白酶抑制剂筛选及活性评价方法的缺点，同时能够避免使用丙型肝炎病毒活病毒引发的安全性顾虑，对生物安全等级要求低，BSL‑1级实验室即可满足实验要求，是高效、准确、稳定、高通量、可重复的用于丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂筛选及药效评价平台。

主权项：1.一种可用于检测丙型肝炎病毒蛋白酶抑制剂活性的质粒，其特征在于，所述质粒包含改造的GFP荧光蛋白的编码核苷酸序列以及丙型肝炎病毒蛋白酶的编码核苷酸序列，所述的改造的GFP荧光蛋白内部包含可被丙型肝炎病毒蛋白酶裂解的蛋白酶切割序列，所述可被丙型肝炎病毒蛋白酶裂解的蛋白酶切割序列插入于野生型GFP荧光蛋白的位置为site3，site3位于如SEQIDNO.9所示的氨基酸序列的QK和NG之间，所述丙型肝炎病毒蛋白酶为NS34A；所述的丙型肝炎病毒蛋白酶的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示，所述蛋白酶切割序列cut1如SEQIDNO.1所示的氨基酸序列；所述的野生型GFP荧光蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.10所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江迪福润丝生物科技有限公司 质粒及HCV蛋白酶抑制剂筛选及药效评价的方法

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