申请/专利权人：上海坤爱生物科技股份有限公司

申请日：2020-11-02

公开（公告）日：2024-02-23

公开（公告）号：CN112280733B

主分类号：C12N5/073

分类号：C12N5/073;C12N5/0775

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.02.23#授权;2021.02.23#实质审查的生效;2021.01.29#公开

摘要：本发明公开了一种羊膜干细胞的提取方法，包括：A1：将羊膜表皮从健康胎盘上机械分离后进行洗涤；A2：将第一培养皿放置在第二培养皿中，第一培养皿的底面开设若干孔；A3：将清洗后的羊膜剪碎后，放入第一培养皿中，加入缓冲液，然后取出第一培养皿，剪碎后的羊膜组织块平铺于第一培养皿底；A4：将带有羊膜组织块的第一培养皿重新放入另一个第二培养皿中，加入培养液培养，静置15‑18天后，加入胰酶消化后，再加入培养液终止消化，取出第一培养皿，然后从混合了细胞的培养液中提取干细胞。本发明能有效的解决现有工艺中高成本低效率问题、以及人工接种方式带来的操作复杂性，能快速的实现提取操作，降低成本，提升工作效率。

主权项：1.一种羊膜干细胞的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：A1：将羊膜表皮从健康胎盘上机械分离后进行洗涤以除去血液和残片；A2：将第一培养皿放置在第二培养皿中，第一培养皿的底面开设若干孔；A3：将清洗后的羊膜剪碎后，放入第一培养皿中，加入缓冲液，然后取出第一培养皿，剪碎后的羊膜组织块平铺于第一培养皿底；A4：将带有羊膜组织块的第一培养皿重新放入另一个第二培养皿中，加入培养液静置培养，15-18天后，提取干细胞；所述步骤A1具体为：将健康羊膜从胎盘上机械分离后，采用磷酸缓冲液清洗，去除杂菌，然后去除羊膜表面残留的血液以及自体所分泌的黏液；所述步骤A3具体为：将清洗后的羊膜剪碎为3cm3-5cm3的羊膜组织块，将羊膜组织块放入第一培养皿中，加入磷酸缓冲液，羊膜组织块处于展开状态，然后取出第一培养皿，此时羊膜组织块平铺于第一培养皿中；所述步骤A4具体包括以下步骤：A401：将带有羊膜组织块的第一培养皿重新放入另一个第二培养皿中，在生物安全柜中采用无菌风干燥，此时羊膜组织块紧贴于第一培养皿底，然后加入20％血清培养液，放入二氧化碳浓度为5％的培养箱中静置培养；A402：静置9-12天后，更换20％血清培养液；A403：静置15-18天后，去除20％血清培养液，采用缓冲液洗涤第一培养皿和第二培养皿，以去除细胞代谢物，组织块代谢物及血清；A404：加入胰酶消化1-2min，然后加入10％血清培养液终止消化，取出第一培养皿，以使干细胞混合在10％血清培养液中；A405：提取干细胞；其中，步骤A1和A2无先后顺序。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 上海坤爱生物科技股份有限公司 一种羊膜干细胞的提取方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD