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【发明公布】CCoAOMT1维持花药bHLH转录网络平衡的鉴定方法及在花粉育性控制中的应用_复旦大学_202311604404.7 

申请/专利权人:复旦大学

申请日:2023-11-28

公开(公告)日:2024-03-01

公开(公告)号:CN117625679A

主分类号:C12N15/84

分类号:C12N15/84;C12N15/54;A01H5/02;A01H6/20;A01H6/82

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.03.19#实质审查的生效;2024.03.01#公开

摘要:本发明提出了CCoAOMT1维持花药bHLH转录网络平衡的鉴定方法及在花粉育性控制中的应用,并获得了雄性半不育及育性恢复的种质资源。本发明通过酵母双杂交Y2H、双分子荧光互补BiFC实验、及免疫共沉淀Co‑IP实验,证实了O‑甲基转移酶CCoAOMT1与转录因子bHLH010、bHLH089的相互作用;又通过构建单独表达bHLH089,以及bHLH089与CCoAOMT1共同表达的瞬时系统和转基因遗传材料,鉴定到CCoAOMT1促进bHLH089出核降解,从而有效降低bHLH转录因子有害过量、将其下游转录网络维持在正常表达水平,保障植物正常雄性育性。本发明进一步利用所述的育性调控基因开发了一种调控植物育性的方法,并对这种方法的过程和调控原理进行了详细阐述验证,从而为不育系培育和杂交育种中植物雄性育性的调控提供了重要的应用价值。

主权项:1.CCoAOMT1对bHLH转录因子调节作用的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:S01:构建载体和转基因植株;S02:构建载体及双分子荧光互补BiFC实验;S03:ProAOMT1::β-GUS葡萄糖醛酸酶株系及GUS染色试验;S04:植株形态和花药发育和育性表型分析;S05:花药半薄切片、花粉壁荧光染色、及花粉扫描电子显微镜SEM观察;S06:RNA纯化、实时定量PCRqRT-PCR、及Co-IP检测;S07:AOMT1作用关键位点的预测;S08:AOMT1-RFP诱导表达体系的构建。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 复旦大学 CCoAOMT1维持花药bHLH转录网络平衡的鉴定方法及在花粉育性控制中的应用

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