申请/专利权人：华南农业大学

申请日：2023-11-22

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN117683799A

主分类号：C12N15/70

分类号：C12N15/70;C07K14/255;G01N33/531;G01N33/569

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.03.12#公开

摘要：本发明属于生物技术领域，公开了一种沙门膜孔蛋白OmpC的制备方法及其在检测中的应用，本OmpC蛋白通过原核表达系统大肠杆菌BL21DE3进行表达，接着按照不可溶蛋白的处理方法进行亲和层析纯化，变性，再复性；并对所制备的蛋白用Bradford试剂盒进行浓度的测定。最后将获得的蛋白作为Elisa检测板的包被抗原。本发明中蛋白的制备方法简单，成本低，容易大批量制备，可应用于ELISA检测方法中，应用前景好。

主权项：1.一种沙门膜孔蛋白OmpC的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、构建重组阳性转化子：以鸡白痢沙门菌S.P376的全基因组为模板扩增目的基因OmpC，将目的基因OmpC与质粒载体重组，后转化筛选得到重组阳性转化子；S2、目的蛋白的表达和纯化：将重组阳性转化子菌株培养进行诱导表达，诱导后的菌体沉淀重悬至含有8M尿素的缓冲液中，经破碎、过滤后纯化；S3、透析复性：将纯化后的蛋白分别在含有6M，4M，2M，1M，0M的透析液的透析袋中进行透析，每4h换一次透析液，透析完成后即得沙门膜孔蛋白OmpC。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 华南农业大学 一种沙门菌膜孔蛋白OmpC的制备方法及其在检测中的应用

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