申请/专利权人：山西大学

申请日：2021-09-13

公开（公告）日：2024-03-12

公开（公告）号：CN113917009B

主分类号：G01N30/02

分类号：G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.12#授权;2022.01.28#实质审查的生效;2022.01.11#公开

摘要：本发明公开了一种北柴胡非皂苷类成分HPLC指纹图谱的构建方法及应用，步骤包括：1）供试品溶液的制备；2）对照品溶液的制备；3）建立色谱条件；4）测定：精密吸取供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，在高效液相色谱条件下进行梯度洗脱，得到HPLC指纹图谱；5）数据分析：对不同种植方式、不同产地的北柴胡进行比较分析，找出可以鉴别不同种植方式、不同产地的北柴胡的标志峰。并结合ROC曲线对特征成分进行预测，利用该方法建立的北柴胡指纹图谱能够较全面的反映北柴胡中的皂苷、黄酮、多炔类等主要化学成分信息，有效监控不同品种、不同产地、不同种植方式北柴胡的质量，本方法精密度高、重现性好，可用于北柴胡的质量控制。

主权项：1.一种北柴胡非皂苷类成分HPLC指纹图谱的构建方法，其特征在于包括如下步骤：1对照品溶液的制备：称取柴胡皂苷b2对照品，加甲醇制成质量浓度为0.1-0.7g·L-1的对照品溶液，4℃保存备用；2北柴胡供试品溶液的制备：取0.5-5.0g北柴胡细粉精密称定，放入锥形瓶中，精密量取甲醇5-50mL，加入锥形瓶中，用封口膜密封，并对它进行称重，超声处理30-60min，在室温中放冷后，再次称重，补足失重，取上清液在高速冷冻离心机中在室温下以8000rmin离心10分钟，取上清液，过0.22μm微孔滤膜，既得供试品溶液；3色谱检测：以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，柱温为20-40℃，流速为0.6-1.5mlmin，检测波长为210-280nm；4测定：精密吸取对照品及供试品溶液各10μL，注入高效液相色谱仪，梯度洗脱，得到指纹图谱；所述梯度洗脱条件为：流动相为0.1％甲酸乙腈和0.1％甲酸水，0～30min，0.1％甲酸乙腈：0.1％甲酸水体积比由10％﹕90％到40％﹕60％；30～55min，0.1％甲酸乙腈：0.1％甲酸水体积为40％﹕60％到75％﹕25％；55～67min，0.1％甲酸乙腈：0.1％甲酸水体积比由75％﹕25％到95％﹕5％；67～70min，0.1％甲酸乙腈：0.1％甲酸水体积比为95％﹕5％到95％﹕5％；所得指纹图谱，包括11个共有峰，各峰号的相对保留时间分别为：①16.014min：槲皮素；②17.392min：异绿原酸A；③21.101min：6,7-Diethoxy-4-methylcoumarin；④23.624min：Prenyletin；⑤37.807min：柴胡皂苷b2；⑥44.355min：Busaliol；⑦54.918min：RB3；⑧58.552min：葛根素；⑨59.119min：RB4；⑩65.340min：RB6； 66.393min：Hexadecanoicacid。

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权利要求：

百度查询： 山西大学 北柴胡非皂苷类成分HPLC指纹图谱的构建方法及应用

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