申请/专利权人：广西大学

申请日：2023-11-23

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN117706015A

主分类号：G01N30/88

分类号：G01N30/88;G01N30/86

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.02#实质审查的生效;2024.03.15#公开

摘要：本发明公开了一种不同产地红糖的HPLC‑DAD指纹图谱的建立方法及其应用。本发明通过高效液相色谱仪联用二极管阵列检测器HPLC‑DAD技术结合共有模式法，对5个红糖主产地广西、广东、云南、贵州和香港的红糖样品进行鉴定，分别建立5个产地独有的HPLC‑DAD指纹图谱共有模式，再进一步建立5个产地共有的HPLC‑DAD指纹图谱共有模式；然后结合相似度评价法和聚类分析，能够快速准确鉴别和分析待测红糖样品的产地，实现红糖产地的追踪溯源。本发明所建立的HPLC‑DAD指纹图谱稳定可靠，能够实现对不同产地红糖的快速、准确鉴别，为红糖生产、流通和使用提供技术支持和科学依据。

主权项：1.一种不同产地红糖的HPLC-DAD指纹图谱的建立方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、制备供试品溶液a、将来自广西的M个不同糖厂的N份干燥红糖样品分别溶解到无水乙醇中，然后在5～15℃条件下进行超声处理，离心取上清液，再置于通风条件下使乙醇全部挥发，加水复溶，分别得到N个广西红糖供试品溶液；其中，M≥1；N≥5；b、按步骤a相同的方法，分别制备得到广东、贵州、香港和云南红糖供试品溶液；S2、HPLC-DAD色谱分析将步骤S1中得到的广西红糖供试品溶液分别利用高效液相色谱进行检测，分别得到每个样品的HPLC-DAD图谱，然后将每个样品的HPLC-DAD图谱数据同时导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件，建立广西独有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式；以此类推，分别建立广东、贵州、香港和云南独有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式；最后将广西、广东、贵州、香港和云南独有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式的图谱数据，共同导入到《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件中，生成5个产地共有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式；其中，高效液相色谱条件如下：色谱柱：AgilentPoroshell120,EC-C18,4.6x100mm,2.7um；检测波长：270nm；柱温：30℃；进样量：20μL；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为体积百分比0.1％的三氟乙酸溶液；采用梯度脱洗：0～5min，2％流动相A，98％流动B，流速0.2mL·min-1；5～15min，3％流动相A，97％流动B，流速0.2mL·min-1；15～25min，5％流动相A，95％流动B，采用梯度流速0.2～0.5mL·min-1；25～35min，7％流动相A，93％流动B，采用梯度流速0.5～1mL·min-1；S3、红糖产地分析1将待确定产地的红糖样品，重复步骤S1和S2，得到待测样品的HPLC-DAD图谱；2指纹图谱相似度评价和聚类分析①将步骤1中得到的待测样品的HPLC-DAD图谱与步骤S2中得到的5个产地共有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式进行相似度分析：若相似度在0.473±0.05之间，则将该红糖样品判定为云南红糖；若相似度在0.915±0.05之间，则将该红糖样品判定为贵州红糖；如果相似度在0.84±0.05之间，则进行下一步操作；反之，若相似度为其他值，则说明不属于广西、广东、贵州、香港或云南红糖；②将待测样品的HPLC-DAD指纹图谱分别与步骤S2中得到的广西、广东和香港独有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式指纹图谱共有模式进行相似度分析：若其与香港独有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式的相似度在0.992～0.999之间，则将该红糖样品判定为香港红糖，反之，则认为红糖样品不属于香港红糖；若其与广西和广东独有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式的相似度均在0.686～0.862之间，则进行下一步操作，反之，若相似度为其他值，则说明不属于广东或广西红糖；③将待测样品的HPLC-DAD指纹图谱与步骤S2中得到的5个产地共有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式的共有峰峰面积进行聚类分析，以确定该红糖样品的产地为广东或广西；或3聚类分析直接将步骤1中得到的待测样品的HPLC-DAD指纹图谱与步骤S2中得到的5个产地共有的HPLC-DAD指纹图谱共有模式的共有峰峰面积进行聚类分析，以确定该红糖样品的产地是否为广西、广东、贵州、香港或云南。

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权利要求：

百度查询： 广西大学 一种不同产地红糖的HPLC-DAD指纹图谱的建立方法及其应用

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