申请/专利权人：重庆工程职业技术学院

申请日：2021-12-15

公开（公告）日：2024-03-15

公开（公告）号：CN115248243B

主分类号：G01N27/48

分类号：G01N27/48;G01N27/30;G01N27/327;G01N33/543;G01N33/574;G01N33/68

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.03.15#授权;2022.11.15#实质审查的生效;2022.10.28#公开

摘要：本发明公开了一种基于超支化聚乙烯亚胺的夹心电化学免疫分析模式对AFP进行检测的方法，将玻碳电极放入超支化聚乙烯亚胺的水溶液中，依次加入硝酸银和甲胎蛋白抗体溶液中，孵育得到传感器anti‑AFPHPEI‑AgNRGCE；将聚甲基丙烯酸N,N‑二甲氨基乙酯与HAuCl4反应得到PDM@Au，再加入甲胎蛋白抗体反应得到生物标记物探针bio‑PDM@Au；将anti‑AFPHPEI‑AgNRGCE和梯度浓度的甲胎蛋白标准样品和牛血清样品一起孵育形成AFPanti‑AFPHPEI‑AgNRGCE，再和bio‑PDM@Au共孵育形成夹心免疫复合物；测定梯度浓度的甲胎蛋白标准样品的电化学响应信号，得到工作曲线。

主权项：1.一种基于超支化聚乙烯亚胺的夹心电化学免疫分析模式对AFP进行检测的方法，其特征在于，步骤为：1将玻碳电极放入超支化聚酰亚胺的水溶液中，在-2.0V的电位下沉积240秒，取出用水清洗，再浸入硝酸银溶液中，在-1.0V的电位下，以100mVs的速度循环扫描20圈，沉积纳米银，之后浸入甲胎蛋白抗体溶液中，在4℃下孵育12小时，制备得到传感器anti-AFPHPEI-AgNRGCE；2将聚甲基丙烯酸N,N-二甲氨基乙酯溶解在去离子水中，加入HAuCl4和NaBH4，在室温下反应24小时，透析，冻干，得到产物PDM@Au；3将PDM@Au溶解到Tris-HCl溶液中，加入甲胎蛋白抗体，室温下搅拌，放入冰箱反应12小时，反应结束后，离心，洗涤，得到生物标记物探针bio-PDM@Au；4将传感器anti-AFPHPEI-AgNRGCE和系列梯度浓度的甲胎蛋白标准样品和牛血清样品孵育50分钟形成抗原抗体复合物传感器AFPanti-AFPHPEI-AgNRGCE；5将步骤4得到的抗原抗体复合物传感器AFPanti-AFPHPEI-AgNRGCE和步骤3得到的探针bio-PDM@Au孵育50分钟形成夹心免疫复合物；6以含有H2O2的PBS为底液，在－200V～－800V的电位范围内进行DVP扫描，测定系列梯度浓度的甲胎蛋白标准样品的电化学响应信号，得到工作曲线。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 重庆工程职业技术学院 一种基于超支化聚乙烯亚胺的夹心电化学免疫分析模式对AFP进行检测的方法

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