申请/专利权人：黑玉星岩国际科学技术(北京)有限公司;北京医院

申请日：2023-12-18

公开（公告）日：2024-03-19

公开（公告）号：CN117721065A

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.05#实质审查的生效;2024.03.19#公开

摘要：本发明公开了用于培养阴道壁组织类器官的培养基及其类器官模型构建的方法，该方法包括：将人阴道壁手术组织经组织酶解液重悬剪碎组织，过滤收集细胞：将酶解后的细胞过滤，用含血清的DMEM培养基清洗细胞、离心、弃上清，后用红细胞裂解液进行红细胞裂解、离心、弃上清后得到阴道壁组织细胞沉淀；将细胞沉淀用阴道壁组织类器官培养基重悬混合Matrigel后置于孵箱中形成凝胶，加阴道壁组织类器官培养基进行培养，后得到阴道壁组织类器官；将阴道壁组织类器官经过清洗、离心、弃上清，加入消化液消化，加入含血清的DMEM培养基终止消化、离心、弃上清后重复细胞原代培养步骤，待细胞生长为阴道壁组织类器官，通过优化细胞分离方法，改进酶解液配制，缩短细胞消化时间，短时获得较高活性的细胞。

主权项：1.一种用于培养阴道壁组织类器官的培养基，其特征在于，包括基础培养基S-Reduce减血清DMENF121:1培养基和特异性添加因子；所述特异性添加因子包括以下终浓度的组分：B-27TMSupplement50X,serumfree，0.5-5×；N-2Supplement100X，1-5×；Nicotinamide，1-10mM；N-acetylcysteine，0.2-5μM；N-Acelyl-L-cysteine，0.5-5mM；EGF，10-500ngml；Noggin，20-500ngml；R-spondin1，100-1000ngml；Wnt3a，50-200ngml；CHIR99021，1-10μM；Thiazovivin，0.5-5μM；VEGFR，5-50ngml；PDGFR，5-50ngml；青霉素链霉素混合液，1-5×；Primocin，0.5-5mgml。

全文数据：

权利要求：

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